本發明屬于農業生物,具體涉及 csraf2基因或其編碼的蛋白在調控黃瓜株型發育中的應用。
背景技術:
1、黃瓜( cucumis?sativus?l.)的地上部株型建成主要由株高、莖粗、葉片大小、分枝、節間長度等決定。不同地區其栽培收獲方式和目標市場差異大,對株型要求不同,合適的株型對于增加黃瓜產量、減少勞動力成本和病蟲害發生具有重要意義。
2、選育優良黃瓜株型已成為重要的育種目標,黃瓜葉片不僅是進行光合作用與蒸騰作用的重要器官,而且葉片形態直接影響黃瓜株型。葉片的形態發育和光合作用、抗逆性等緊密相關。栽培黃瓜時,通常需要人工去除老葉和病葉,減少病害。因此,黃瓜葉片的生長發育是影響產量和品質的提升的關鍵因素。
3、已經報道黃瓜葉片發育的相關基因較少。目前關于黃瓜葉片基因有調控葉片發育和形狀的小葉基因 csll,調控黃瓜葉片和葉柄角的 cshls1基因,調控黃瓜葉片和果實數量的 csraxs([1]?chunhua?wang,?jie?li,?kai?fang,?et?al.?cshls1-csscl28?moduleregulates?compact?plant?architecture?in?cucumber.? plant?biotechnol?journal,2024,?22(6):1724-1739.?[2]?luming?yang,?hanqiang?liu,?jianyu?zhao,?et?al.littleleaf?(ll)?encodes?a?wd40?repeat?domain‐containing?protein?associatedwith?organ?size?variation?in?cucumber.? the?plant?journal,?2018,?95(9):?834-847.?[3]?jiacai?chen,?liu?liu,?guangxin?chen,?et?al. csraxs?negativelyregulate?leaf?size?and?fruiting?ability?through?auxin?glycosylation?incucumber. ?journal?of?integrative?plant?biology, ?2024, 66:?1024-1037.)。
4、但是關于基因 csraf2在黃瓜調控株型中的作用,暫時未見報道。
技術實現思路
1、本發明針對現有技術中存在的上述不足,提供了 csraf2基因或其編碼的蛋白在調控黃瓜株型發育中的應用,具體調節黃瓜葉片和葉柄長短。
2、本發明首先提供了 csraf2基因或其編碼的蛋白在調控黃瓜株型發育中的應用。
3、優選的,調控為通過將 csraf2基因敲除或將 csraf2基因編碼的蛋白功能缺失,使得黃瓜葉片大小減小和葉柄變短。
4、優選的,所述 csraf2基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示, csraf2基因編碼的蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
5、優選的,將 csraf2基因敲除時,基因敲除針對的靶點序列為:
6、靶點1:ggaaatcgcgagcaatttcgggg,
7、靶點2:ggtggtggggttggggaagaggg。
8、本發明又提供了一種調控黃瓜株型發育的方法,通過將 csraf2基因敲除或將 csraf2基因編碼的蛋白功能缺失,使得黃瓜葉片大小減小和葉柄變短。
9、優選的,所述調控黃瓜株型發育的方法中,所述 csraf2基因的核苷酸序列如seqid?no.1所示。
10、優選的,所述調控黃瓜株型發育的方法包括以下步驟:
11、(1)構建基因敲除載體,所述基因敲除載體為帶有用于對堿基序列如seq?id?no.1所示的 csraf2基因進行敲除的序列的植物表達載體;
12、(2)將步驟(1)基因敲除載體導入黃瓜的細胞中將 csraf2基因敲除,培養后得到轉基因黃瓜植株。
13、優選的,所述植物表達載體為pcbsg015?(basta)。
14、優選的,基因敲除針對的靶點序列為:
15、靶點1:ggaaatcgcgagcaatttcgggg,
16、靶點2:ggtggtggggttggggaagaggg。
17、本發明的有益效果:
18、本發明發現了黃瓜 csraf2基因與黃瓜株型相關,黃瓜編輯株系葉片較wt顯著減小和葉柄較wt顯著變短,該基因能夠應用于改良黃瓜株型發育方面的應用。
1.csraf2基因或其編碼的蛋白在調控黃瓜株型發育中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,調控為通過將csraf2基因敲除或將csraf2基因編碼的蛋白功能缺失,使得黃瓜葉片大小減小和葉柄變短。
3.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述csraf2基因的核苷酸序列如seq?idno.1所示,csraf2基因編碼的蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
4.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,將csraf2基因敲除時,基因敲除針對的靶點序列為:
5.一種調控黃瓜株型發育的方法,其特征在于,通過將csraf2基因敲除或將csraf2基因編碼的蛋白功能缺失,使得黃瓜葉片大小減小和葉柄變短。
6.根據權利要求5所述調控黃瓜株型發育的方法,其特征在于,所述csraf2基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
7.根據權利要求5所述調控黃瓜株型發育的方法,其特征在于,包括以下步驟:
8.根據權利要求7所述調控黃瓜株型發育的方法,其特征在于,所述植物表達載體為pcbsg015?(basta)。
9.根據權利要求7所述調控黃瓜株型發育的方法,其特征在于,基因敲除針對的靶點序列為: