本發明涉及微生物,特別涉及一種耐鉻(ⅵ)屎腸球菌及其分離方法與應用。
背景技術:
1、鉻污染是當前環境與農業領域面臨的嚴峻問題之一。在冶金、電鍍、制革及印染等工業活動中產生的大量含鉻廢渣、廢水及廢氣,導致六價鉻離子在環境中不斷積累。此類污染物可通過水體滲流、土壤遷移等途徑進入生態系統,并通過飼料等途徑在家禽體內富集,對動物健康構成直接威脅。因此,鉻污染是家禽鉻中毒的重要途徑,控制飼料中六價鉻的含量是保障家禽健康的必要措施,目前六價鉻中毒尚無特效解毒藥物。
2、近年來,利用微生物吸附成為研究熱點,屎腸球菌作為動物腸道中的常見益生菌,具有良好的耐酸、耐膽鹽特性,已在飼料添加劑中顯示出改善腸道健康、促進生長等積極作用。然而,普通屎腸球菌對高濃度六價鉻的耐受性與吸附能力有限,難以直接應用于鉻污染基質的修復。因此,需要篩選并獲得具有高效鉻耐受與吸附能力的專用菌株。
技術實現思路
1、本發明的第一個目的是提供一種耐鉻(ⅵ)屎腸球菌,cren0318菌株于2025年10月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,地址:北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所,分類命名為:屎腸球菌(enterococcus?faecium),保藏號為cgmcc?no.36330,該屎腸球菌可以在高濃度的鉻(ⅵ)環境生存,并對六價鉻具有較強的吸附效果,降低六價鉻在飼料中的殘留與生物蓄積,從而減輕對家禽的毒性危害。
2、本發明的第二個目的是提供上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的分離方法。
3、本發明的第三個目的是提供上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在吸附鉻污染基質中的應用。
4、本發明第四個目的是提供上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在制備鉻吸附劑中的應用。
5、本發明第五個目的是提供一種鉻吸附劑,包括上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
6、本發明第六個目的是提供上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在抑制金黃色葡萄球菌和沙門氏菌上的應用。
7、為了實現上述發明目的,本發明耐鉻(ⅵ)屎腸球菌及其分離方法與應用采用的如下技術方案:
8、一種耐鉻(ⅵ)屎腸球菌,分類命名為屎腸球菌(enterococcus?faecium),2025年10月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為cgmccno.36330。
9、優選的,所述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的16s?rrna基因序列如序列表seq?id?no.1所示。
10、上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的分離方法,包括如下步驟:
11、(1)取健康家禽糞便樣本,加入無菌生理鹽水,混勻、離心后取上清液,然后用無菌生理鹽水進行逐級稀釋;
12、(2)將步驟(1)得到的稀釋液涂布于含鉻(ⅵ)的膽汁七葉苷疊氮鈉固體培養基上,在37℃下厭氧培養24小時;
13、(3)從步驟(2)的培養基上挑取單菌落,接種至含鉻(ⅵ)的膽汁七葉苷疊氮鈉固體培養基上,在37℃下厭氧培養24小時;
14、(4)重復步驟(3)的操作至少一次,最終獲得的單菌落培養物即為耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
15、優選的,所述膽汁七葉苷疊氮鈉固體培養基中的鉻(ⅵ)濃度為80mg/l。
16、上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在吸附鉻污染基質中的應用,在鉻污染基質中加入耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
17、優選的,所述鉻污染基質的ph為4~6。
18、優選的,所述鉻污染基質為動物飼料。
19、上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在制備鉻吸附劑中的應用。
20、一種鉻吸附劑,包括上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
21、上述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在抑制金黃色葡萄球菌和沙門氏菌上的應用。
22、與現有技術相比,本發明的有益效果在于:
23、1、本發明提供的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌具有優異的耐鉻性能與吸附能力。該菌株可在高達800mg/l的鉻(ⅵ)濃度下存活,并在ph?4~6范圍內對5mg/l鉻(ⅵ)溶液表現出97.5%~98.5%的高吸附率,吸附效率顯著優于普通屎腸球菌。
24、2、本發明的菌株來源于健康家禽糞便,具有良好的宿主適應性與飼料應用潛力。該菌株可直接用于動物飼料的修復,通過高效吸附六價鉻,降低其在飼料中的殘留與生物蓄積,從而減輕鉻對家禽的毒性危害。
25、3、本發明具備良好的膽鹽耐受性以及對金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的抑菌活性,顯示出較強的環境適應性與生物安全性。
1.一種耐鉻(ⅵ)屎腸球菌,其特征在于,分類命名為屎腸球菌(enterococcusfaecium),2025年10月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為cgmcc?no.36330。
2.根據權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌,其特征在于:所述耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的16s?rrna基因序列如序列表seq?id?no.1所示。
3.一種如權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的分離方法,其特征在于,包括如下步驟:
4.根據權利要求3所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌的分離方法,其特征在于:所述膽汁七葉苷疊氮鈉固體培養基中的鉻(ⅵ)濃度為80mg/l。
5.根據權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在吸附鉻污染基質中的應用,其特征在于:在鉻污染基質中加入耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
6.根據權利要求5所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在吸附鉻污染基質中的應用,其特征在于:所述鉻污染基質的ph為4~6。
7.根據權利要求5所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在吸附鉻污染基質中的應用,其特征在于:所述鉻污染基質為動物飼料。
8.根據權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在制備鉻吸附劑中的應用。
9.一種鉻吸附劑,其特征在于:包括權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌。
10.根據權利要求1所述的耐鉻(ⅵ)屎腸球菌在抑制金黃色葡萄球菌和沙門氏菌上的應用。