本發明屬于生物醫藥，具體涉及聯合nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾在診治退行性主動脈瓣疾病中的應用。
背景技術：
1、退行性主動脈瓣疾病（degenerative?aortic?valve?disease,?davd）是嚴重危害老年人健康的重大心血管疾病，主要病理特征為主動脈瓣瓣葉進行性纖維化與鈣化，導致瓣膜增厚、僵硬及功能異常，進而引發主動脈瓣狹窄或關閉不全，是老年人心力衰竭、心律失常及猝死的重要誘因之一。davd并非單純的年齡相關退行性改變，而是一個由瓣膜內皮損傷、炎癥細胞浸潤、細胞外基質重塑及瓣膜間質細胞（valvular?interstitial?cells,vics）異常成骨樣分化驅動的主動病理過程。目前davd發病機制尚未完全闡明，臨床仍缺乏針對性藥物治療手段，主要依賴外科手術或介入方式進行主動脈瓣置換。然而，現有瓣膜替代物存在明顯局限，給患者帶來沉重的醫療風險與經濟負擔。因此，深入解析davd的發病機制，開發精準干預新靶點與新策略，對于延緩或逆轉瓣膜鈣化進程、改善老年患者預后具有重要臨床價值與社會意義。
2、n4-乙酰胞苷（n4-acetylcytidine,ac4c）是rna修飾的方式之一，在轉錄后基因調控中起重要作用，能夠增強mrna的穩定性、翻譯效率和精確性。n-乙酰轉移酶10（n-acetyltransferase?10,nat10）是目前已知哺乳動物中唯一催化ac4c的“書寫酶”，在心肌細胞凋亡、血管重塑以及心臟重構等心臟疾病的發生發展中起著關鍵作用。最近的研究表明，nat10能夠促進間充質干細胞的成骨分化。然而，nat10在davd過程中對人主動脈瓣膜間質細胞（hvics）成骨分化的潛在作用及調控機制仍未完全闡明。
3、前蛋白轉化酶枯草溶菌素/kexin9型（proprotein?convertase?subtilisin/kexin?type?9,pcsk9）是脂代謝領域研究明確的調控因子，而除脂代謝穩態調控這一經典功能外，越來越多的研究證據表明，pcsk9在davd中還具有促鈣化作用。盡管pcsk9在davd發病機制中發揮關鍵作用，但在davd病理背景下，pcsk9的表達是否受轉錄后修飾調控及其調控機制如何，目前尚未明確。
技術實現思路
1、針對上述背景中存在的問題，本發明通過研究nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾水平在退行性主動脈瓣疾病中變化及其對人主動脈瓣間質細胞成骨分化的影響，提出聯合檢測nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾水平可診斷退行性主動脈瓣疾病，聯合靶向nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾可制備或篩選治療退行性主動脈瓣疾病的藥物，從而為退行性主動脈瓣疾病的診斷和治療提供了新思路。
2、為實現上述技術目的，本發明采用了以下技術方案：
3、本發明目的之一是提供一種聯合靶向nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的制劑在制備用于診治退行性主動脈瓣疾病的產品中的應用。
4、進一步的，所述制劑為nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的聯合檢測制劑，所述產品為用于診斷退行性主動脈瓣疾病的產品或用于評估退行性主動脈瓣疾病嚴重程度的產品。
5、進一步的，所述產品包括試劑或試劑盒。
6、進一步的，所述試劑或試劑盒用于檢測樣本中nat10的表達水平和/或pcsk9?mrna的ac4c修飾水平。
7、進一步的，所述nat10的表達水平為nat10?mrna水平或nat10蛋白水平。
8、進一步的，所述樣本包括主動脈瓣組織。
9、進一步的，所述制劑為nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的聯合抑制劑，所述產品為用于治療退行性主動脈瓣疾病的藥物或藥物組合物。
10、本發明目的之二是提供一種用于治療退行性主動脈瓣疾病的藥物或藥物組合物，所述藥物或藥物組合物包括藥學上可接受的載體和有效量的活性成分，所述活性成分包括nat10基因或蛋白的抑制劑以及pcsk9?mrna的ac4c修飾抑制劑。
11、進一步的，所述nat10基因或蛋白的抑制劑為小分子化合物、核酸抑制劑或抗體。
12、進一步的，所述pcsk9?mrna的ac4c修飾抑制劑通過抑制ac4c“書寫”酶活性、增強ac4c“擦除”酶活性和/或直接阻斷ac4c修飾過程發揮作用。
13、與現有技術相比，本發明具有以下的有益效果：
14、(1)本發明首次將nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾這兩個在生物學上緊密關聯的分子事件組合為診斷標志物，通過檢測人主動脈瓣組織中nat10表達和pcsk9?mrna的ac4c修飾水平，證明二者在davd組織中均特異性顯著升高，且與疾病嚴重程度密切相關，提示聯合檢測nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾水平可用于退行性主動脈瓣疾病的診斷。另外，聯合檢測兩項指標可形成互補，相比于單一指標，有望大幅提升早期診斷和風險分層的準確性。并且該標志物組合可能存在于外周血中，為開發無創、便攜的早期篩查試劑或試劑盒奠定了基礎。
15、(2)本發明通過研究nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾對人主動脈瓣膜間質細胞成骨分化的影響，證明了nat10可通過提高pcsk9?mrna的ac4c修飾水平而促進人主動脈瓣膜間質細胞成骨分化，明確了davd的完整致病軸，為藥物開發提供了兩個可干預的靶點。并且，抑制nat10可降低pcsk9?mrna的ac4c修飾水平進而抑制人主動脈瓣膜間質細胞成骨分化，從而延緩或抑制瓣膜鈣化，提示聯合靶向nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾可用于制備或篩選用于治療退行性主動脈瓣疾病的藥物，且同時干預兩者可能產生協同治療效應，為退行性主動脈瓣疾病的靶向藥物治療提供了新思路。
1.一種聯合靶向nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的制劑在制備用于診治退行性主動脈瓣疾病的產品中的應用。
2.根據權利要求1所述的應用，所述制劑為nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的聯合檢測制劑，所述產品為用于診斷退行性主動脈瓣疾病的產品或用于評估退行性主動脈瓣疾病嚴重程度的產品。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品包括試劑或試劑盒。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述試劑或試劑盒用于檢測樣本中nat10的表達水平和/或pcsk9?mrna的ac4c修飾水平。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述nat10的表達水平為nat10?mrna水平或nat10蛋白水平。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述樣本包括主動脈瓣組織。
7.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述制劑為nat10和pcsk9?mrna的ac4c修飾的聯合抑制劑，所述產品為用于治療退行性主動脈瓣疾病的藥物或藥物組合物。
8.一種用于治療退行性主動脈瓣疾病的藥物或藥物組合物，其特征在于，所述藥物或藥物組合物包括藥學上可接受的載體和有效量的活性成分，所述活性成分包括nat10基因或蛋白的抑制劑以及pcsk9?mrna的ac4c修飾抑制劑。
9.根據權利要求8所述的藥物或藥物組合物，其特征在于，所述nat10基因或蛋白的抑制劑為小分子化合物、核酸抑制劑或抗體。
10.根據權利要求8所述的藥物或藥物組合物，其特征在于，所述pcsk9?mrna的ac4c修飾抑制劑通過抑制ac4c“書寫”酶活性、增強ac4c“擦除”酶活性和/或直接阻斷ac4c修飾過程發揮作用。