本發明涉及其他非酒精飲料的制備，尤其是一種蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法。
背景技術：
蠶蛹蛋白主要是球蛋白以及少量清蛋白和結合于外表皮的蛋白，蠶蛹蛋白由18種氨基酸組成，其中8種人體必需氨基酸齊全，其總量約為40%，比例適當，是一種營養價值極高的昆蟲蛋白資源。我國是世界上最大的蠶絲生產國，全國的蠶絲產量約占世界的4/5。蠶蛹是繅絲過程中的主要副產物，一般每生產1Kg蠶絲就約有0.8Kg的干蠶蛹，因此，全國年產干蠶蛹達30萬噸以上。而干蠶蛹除了一小部分被用于食用和藥用，絕大部分被用于動物飼料。
近年來，多肽越來越受到重視，現代生物學實驗已經證明，多肽與蛋白質和氨基酸相比具有更多優點：多肽在腸道中的吸收率最好，一些低肽如二肽、三肽的吸收速度比同一組成的氨基酸快；多肽具有低抗原、促進脂質代謝、降低膽固醇、促進礦物質吸收、降血壓、抗氧化、強化機體免疫、促進人體新陳代謝等生理功能作用。因此，如何將蠶蛹制備成有利于人體吸收、附加值高的多肽產品是廣大技術人員亟待解決的問題。
技術實現要素：
為了克服現有蠶蛹存在利用率及附加值低的不足，本發明提供一種工藝合理、操作簡單可行、生產成本低、操作可靠、環境污染小、口感好的蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法。
本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：一種蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其特征在于：其經過下列工藝步驟：
a、原料選取 選取無污染、無腐敗變質的蠶蛹為原料；
b、原料處理 稱量步驟a中所選取的蠶蛹，加入蠶蛹質量5～10倍的水浸泡3～4h，再采用清水沖洗干凈，然后送入組織搗碎機加入蠶蛹質量3～5倍的水搗碎成漿狀，得蠶蛹漿液；
c、溶解、提取 將步驟b中得到的蠶蛹漿液加入蠶蛹質量8～15倍的、濃度為0.5%～1.0%的氫氧化鈉溶液，攪拌均勻，升溫至75℃～85℃，保持3～5h，提取蠶蛹漿液中的蛋白質，得蠶蛹蛋白提取液；
d、分離 將步驟c中得到的蠶蛹蛋白質提取液降溫至50℃以下，離心，收集清液，得蠶蛹蛋白清液；
e、脫脂 將步驟d中得到的蠶蛹蛋白清液繼續冷卻至30℃以下，分離出蠶蛹蛋白清液中的殘余油脂，得脫脂的蠶蛹蛋白液；
f、沉淀、脫鹽 將步驟e中得到的脫脂的蠶蛹蛋白液泵入沉淀罐中，用10%的硫酸溶液或鹽酸溶液調節脫脂的蠶蛹蛋白液的pH值為4.0～4.2，靜置沉淀10h以上，然后放出上清液，沉淀離心分離，得蠶蛹粗分離蛋白；將蠶蛹粗分離蛋白用其質量15～20倍、pH值為4.0～4.2的純凈水洗滌2～3次，同法靜置，離心，得脫鹽的蠶蛹分離蛋白；
g、水解 將步驟f中得到的脫鹽的蠶蛹分離蛋白用純凈水分散成固形物濃度為15%～25%的溶液，用氫氧化鈉溶液調節pH值為9.0～9.5，升溫至溫度50℃～55℃，加入脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量1%～4%的胰蛋白酶，攪拌保溫水解40～60min，然后向水解液中再次加入木瓜蛋白酶，其加入量為脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量的0.5%～1%，保持溫度50℃～55℃，繼續酶解2～3h，得蠶蛹蛋白酶解液；
h、脫色 將步驟g中得到的蠶蛹蛋白酶解液加入其質量3%～5%的活性炭，升溫料液溫度至85℃～95℃，保持10min～15min，然后過濾，得脫色的蠶蛹蛋白酶解液；
i、干燥 將步驟h中得到的脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液用氫氧化鈉溶液調節pH值為5.5～6.0，然后送入真空干燥機內，控制干燥條件進行低溫真空干燥，得蠶蛹蛋白肽粉；
j、混合 稱取步驟i得到的蠶蛹蛋白肽粉、市售的木糖醇、檸檬酸、蛋白糖、山梨酸鉀、山楂黃酮粉末和蒸餾水，混合均勻，得混合液；混合液進行硅藻土過濾，收集濾液，得澄清液；其中，在所述的混合液中，蠶蛹蛋白肽粉的重量百分比為6.0%～7.2%、木糖醇為5.5%～6.5%、檸檬酸0.2%～0.25%、蛋白糖0.05%～0.15%、山梨酸鉀0.03%～0.05%、山楂黃酮粉末0.2～0.3%，余量為蒸餾水，各組分的重量百分比之和為100%；
k、滅菌、過濾 將步驟j中得到的澄清液送入瞬時高溫滅菌器于95～100℃下處理30～35s，再送入儲存罐進行陳化36～48h，然后進行硅藻土過濾，其過濾液用孔徑為0.5微米的微孔濾膜進行精濾，收集精濾液送入瞬時高溫滅菌器于95～100℃下處理15～20s；
l、灌裝 將步驟k中得到的滅菌后的精濾液用灌裝機按預設重量進行分瓶灌裝，封口，得蠶蛹復合蛋白肽口服液。
所述的真空干燥機的干燥條件為：真空度控制為0.01～0.03 kpa，溫度控制為35～60℃。
所述的山楂黃酮粉末的山楂黃酮含量為70%～75%。
本發明是選取無污染、無腐敗變質的蠶蛹為原料，經搗碎后加入氫氧化鈉溶液，將原料中的蠶蛹蛋白充分地溶解于氫氧化鈉溶液中；再經過濾去除蠶蛹粕殘渣等雜質，清液脫脂后送入沉淀罐中加入鹽酸溶液或硫酸溶液進行沉淀，沉淀經水洗去除可溶性雜質，以提高其純度，然后控制條件加入胰蛋白酶進行一次水解，然后加入木瓜蛋白酶，進行兩次水解；酶解液脫色，干燥，得蠶蛹蛋白肽粉；將蠶蛹蛋白肽粉與木糖醇、檸檬酸、蛋白糖、山梨酸鉀、山楂黃酮粉末和蒸餾水進行調配，再經瞬時高溫滅菌，陳化，粗濾，精濾，瞬時高溫滅菌，灌裝，制得蠶蛹復合蛋白肽口服液。本發明采用蛋白酶進行二次水解對環境污染小，蠶蛹蛋白肽粉的得率及純度高，人體易消化吸收。本發明工藝合理，操作簡單可行，生產成本低，制得到的蠶蛹復合蛋白肽口服液口感良好，大大提高蠶蛹的附加值，為蠶蛹的利用提供了一個新途徑。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明做進一步說明。
實施例1
一種蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其經過下列工藝步驟：
a、原料選取 選取無污染、無腐敗變質的蠶蛹為原料；
b、原料處理 稱量步驟a中所選取的蠶蛹，加入蠶蛹質量8倍的水浸泡3.5h，再采用清水沖洗干凈，然后送入組織搗碎機加入蠶蛹質量4倍的水搗碎成漿狀，得蠶蛹漿液；
c、溶解、提取 將步驟b中得到的蠶蛹漿液加入蠶蛹質量10倍的、濃度為0.6%的氫氧化鈉溶液，攪拌均勻，升溫至80℃，保持4h，提取蠶蛹漿液中的蛋白質，得蠶蛹蛋白提取液；
d、分離 將步驟c中得到的蠶蛹蛋白質提取液降溫至45℃，用臥式螺旋離心機以3000r/min進行離心處理，分離出蠶蛹蛋白液和蠶蛹粕殘渣，收集清液，得蠶蛹蛋白清液；
e、脫脂 將步驟d中得到的蠶蛹蛋白清液繼續冷卻至25℃，送入蝶式分離機分離出蠶蛹蛋白清液中的殘余油脂，得脫脂的蠶蛹蛋白液；
f、沉淀、脫鹽 將步驟e中得到的脫脂的蠶蛹蛋白液泵入沉淀罐中，用10%的硫酸溶液調節脫脂的蠶蛹蛋白液的pH值為4.1，靜置沉淀12h，然后放出上清液，沉淀用臥式螺旋離心機3000r/min進行離心處理，分離獲得蠶蛹粗分離蛋白；將蠶蛹粗分離蛋白用其質量18倍、pH值為4.1的純凈水洗滌3次，同法靜置，離心，得脫鹽的蠶蛹分離蛋白；
g、水解 將步驟f中得到的脫鹽的蠶蛹分離蛋白用純凈水分散成固形物濃度為20%的溶液，用氫氧化鈉溶液調節pH值為9.2，升溫至溫度52℃，加入脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量3%的胰蛋白酶，攪拌保溫水解50min，然后向水解液中再次加入木瓜蛋白酶，其加入量為脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量的0.8%，保持溫度52℃，繼續酶解2.5h，得蠶蛹蛋白酶解液；
h、脫色 將步驟g中得到的蠶蛹蛋白酶解液加入其質量4%的活性炭，升溫料液溫度至90℃，保持12min，然后用真空過濾機過濾，得脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液；
i、干燥 將步驟h中得到的脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液用氫氧化鈉溶液調節pH值為5.8，然后送入真空干燥機內，控制真空干燥機的干燥條件為：真空度0.02kpa，溫度控制為50℃，進行低溫真空干燥，得蠶蛹蛋白肽粉；
j、混合 稱取步驟i得到的蠶蛹蛋白肽粉、市售的木糖醇、檸檬酸、蛋白糖、山梨酸鉀、山楂黃酮粉末和蒸餾水，混合均勻，得混合液；混合液進行硅藻土過濾，收集濾液，得澄清液；在混合液中，蠶蛹蛋白肽粉的重量百分比為6.5%、木糖醇為6.0%、檸檬酸0.22%、蛋白糖0.1%、山梨酸鉀0.04%、山楂黃酮粉末0.25%和蒸餾水86.89%，其中，山楂黃酮粉末的山楂黃酮含量為72%；
k、滅菌、過濾 將步驟j中得到的澄清液送入瞬時高溫滅菌器于98℃下處理32s，再送入儲存罐進行陳化40h，然后進行硅藻土過濾，其過濾液用孔徑為0.5微米的微孔濾膜進行精濾，收集精濾液送入瞬時高溫滅菌器于98℃下處理18s；
l、灌裝 將步驟k中得到的滅菌后的精濾液用灌裝機按每瓶100g進行分瓶灌裝，封口，得蠶蛹復合蛋白肽口服液。
本實施例所提供的蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其工藝合理，操作簡單可行，生產成本低，采用蛋白酶進行兩次水解對環境污染小，蠶蛹蛋白肽粉的得率及純度高，人體易消化吸收，制得到的蠶蛹復合蛋白肽口服液口感良好，大大提高蠶蛹的附加值和利用率。
實施例2
一種蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其經過下列工藝步驟：
a、原料選取 選取無污染、無腐敗變質的蠶蛹為原料；
b、原料處理 稱量步驟a中所選取的蠶蛹，加入蠶蛹質量10倍的水浸泡3h，再采用清水沖洗干凈，然后送入組織搗碎機加入蠶蛹質量3倍的水搗碎成漿狀，得蠶蛹漿液；
c、溶解、提取 將步驟b中得到的蠶蛹漿液加入蠶蛹質量15倍的、濃度為0.5%的氫氧化鈉溶液，攪拌均勻，升溫至75℃，保持5h，提取蠶蛹漿液中的蛋白質，得蠶蛹蛋白提取液；
d、分離 將步驟c中得到的蠶蛹蛋白質提取液降溫至40℃，用臥式螺旋離心機以4000r/min進行離心處理，分離出蠶蛹蛋白液和蠶蛹粕殘渣，收集清液，得蠶蛹蛋白清液；
e、脫脂 將步驟d中得到的蠶蛹蛋白清液繼續冷卻至20℃，送入蝶式分離機分離出蠶蛹蛋白清液中的殘余油脂，得脫脂的蠶蛹蛋白液；
f、沉淀、脫鹽 將步驟e中得到的脫脂的蠶蛹蛋白液泵入沉淀罐中，用10%的鹽酸溶液調節脫脂的蠶蛹蛋白液的pH值為4.2，靜置沉淀10h，然后放出上清液，沉淀用臥式螺旋離心機5000r/min進行離心處理，分離獲得蠶蛹粗分離蛋白，得蠶蛹粗分離蛋白；將蠶蛹粗分離蛋白用其質量20倍、pH值為4.2的純凈水洗滌2次，同法靜置，離心，得脫鹽的蠶蛹分離蛋白；
g、水解 將步驟f中得到的脫鹽的蠶蛹分離蛋白用純凈水分散成固形物濃度為15%的溶液，用氫氧化鈉溶液調節pH值為9.0，升溫至溫度50℃，加入脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量1%的胰蛋白酶，攪拌保溫水解60min，然后向水解液中再次加入木瓜蛋白酶，其加入量為脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量的1%，保持溫度50℃，繼續酶解2h，得蠶蛹蛋白酶解液；
h、脫色 將步驟g中得到的蠶蛹蛋白酶解液加入其質量5%的活性炭，升溫料液溫度至85℃，保持15min，然后用真空過濾機過濾，得脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液；
i、干燥 將步驟h中得到的脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液用氫氧化鈉溶液調節pH值為6.0，然后送入真空干燥機內，控制真空干燥機的干燥條件為：真空度控制為0.03 kpa，溫度控制為35℃，進行低溫真空干燥，得蠶蛹蛋白肽粉；
j、混合 稱取步驟i得到的蠶蛹蛋白肽粉、市售的木糖醇、檸檬酸、蛋白糖、山梨酸鉀、山楂黃酮粉末和蒸餾水，混合均勻，得混合液；混合液進行硅藻土過濾，收集濾液，得澄清液；在混合液中，蠶蛹蛋白肽粉的重量百分比為7.2%、木糖醇為5.5%、檸檬酸0.25%、蛋白糖0.05%%、山梨酸鉀0.05%、山楂黃酮粉末0.3%和蒸餾水86.65%，其中，山楂黃酮粉末的山楂黃酮含量為70%；
k、滅菌、過濾 將步驟j中得到的澄清液送入瞬時高溫滅菌器于100℃下處理30s，再送入儲存罐進行陳化36h，然后進行硅藻土過濾，其過濾液用孔徑為0.5微米的微孔濾膜進行精濾，收集精濾液送入瞬時高溫滅菌器于100℃下處理15s；
l、灌裝 將步驟k中得到的滅菌后的精濾液用灌裝機按每瓶150g進行分瓶灌裝，封口，得蠶蛹復合蛋白肽口服液。
本實施例所提供的蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其工藝合理，操作簡單可行，生產成本低，采用蛋白酶進行兩次水解對環境污染小，蠶蛹蛋白肽粉的得率及純度高，制得到的蠶蛹復合蛋白肽口服液口感良好，大大提高蠶蛹的附加值和利用率。
實施例3
一種蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其經過下列工藝步驟：
a、原料選取 選取無污染、無腐敗變質的蠶蛹為原料；
b、原料處理 稱量步驟a中所選取的蠶蛹，加入蠶蛹質量5倍的水浸泡4h，再采用清水沖洗干凈，然后送入組織搗碎機加入蠶蛹質量5倍的水搗碎成漿狀，得蠶蛹漿液；
c、溶解、提取 將步驟b中得到的蠶蛹漿液加入蠶蛹質量8倍的、濃度為1.0%的氫氧化鈉溶液，攪拌均勻，升溫至85℃，保持3h，提取蠶蛹漿液中的蛋白質，得蠶蛹蛋白提取液；
d、分離 將步驟c中得到的蠶蛹蛋白質提取液降溫至50℃，用臥式螺旋離心機以3000r/min進行離心處理，分離出蠶蛹蛋白液和蠶蛹粕殘渣，收集清液，得蠶蛹蛋白清液；
e、脫脂 將步驟d中得到的蠶蛹蛋白清液繼續冷卻至30℃，送入蝶式分離機分離出蠶蛹蛋白清液中的殘余油脂，得脫脂的蠶蛹蛋白液；
f、沉淀、脫鹽 將步驟e中得到的脫脂的蠶蛹蛋白液泵入沉淀罐中，用10%的鹽酸溶液調節脫脂的蠶蛹蛋白液的pH值為4.0，靜置沉淀15h，然后放出上清液，沉淀用臥式螺旋離心機3500r/min進行離心處理，分離獲得蠶蛹粗分離蛋白，得蠶蛹粗分離蛋白；將蠶蛹粗分離蛋白用其質量15倍、pH值為4.0的純凈水洗滌2次，同法靜置，離心，得脫鹽的蠶蛹分離蛋白；
g、水解 將步驟f中得到的脫鹽的蠶蛹分離蛋白用純凈水分散成固形物濃度為25%的溶液，用氫氧化鈉溶液調節pH值為9.5，升溫至溫度55℃，加入脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量4%的胰蛋白酶，攪拌保溫水解40min，然后向水解液中再次加入木瓜蛋白酶，其加入量為脫鹽的蠶蛹分離蛋白質量的0.5%，保持溫度55℃，繼續酶解3h，得蠶蛹蛋白酶解液；
h、脫色 將步驟g中得到的蠶蛹蛋白酶解液加入其質量3%的活性炭，升溫料液溫度至95℃，保持10min，然后用真空過濾機過濾，得脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液；
i、干燥 將步驟h中得到的脫色的蠶蛹蛋白酶解過濾液用氫氧化鈉溶液調節pH值為5.5，然后送入真空干燥機內，控制真空干燥機的干燥條件為：真空度控制為0.01kpa，溫度控制為60℃，進行低溫真空干燥，得蠶蛹蛋白肽粉；
j、混合 稱取步驟i得到的蠶蛹蛋白肽粉、市售的木糖醇、檸檬酸、蛋白糖、山梨酸鉀、山楂黃酮粉末和蒸餾水，混合均勻，得混合液；混合液進行硅藻土過濾，收集濾液，得澄清液；在混合液中，蠶蛹蛋白肽粉的重量百分比為6.0%、木糖醇為6.5%、檸檬酸0.2%、蛋白糖0.15%、山梨酸鉀0.03%、山楂黃酮粉末0.2%和蒸餾水86.92%，其中，山楂黃酮粉末的山楂黃酮含量為75%；
k、滅菌、過濾 將步驟j中得到的澄清液送入瞬時高溫滅菌器于95℃下處理35s，再送入儲存罐進行陳化48h，然后進行硅藻土過濾，其過濾液用孔徑為0.5微米的微孔濾膜進行精濾，收集精濾液送入瞬時高溫滅菌器于95℃下處理20s；
l、灌裝 將步驟k中得到的滅菌后的精濾液用灌裝機按每瓶200g進行分瓶灌裝，封口，得蠶蛹復合蛋白肽口服液。
本實施例所提供的蠶蛹復合蛋白肽口服液的制備方法，其工藝合理，操作簡單可行，生產成本低，采用蛋白酶進行兩次水解對環境污染小，蠶蛹蛋白肽粉的得率及純度高，制得到的蠶蛹復合蛋白肽口服液口感良好，人體易消化吸收，大大提高蠶蛹的附加值和利用率。