本發(fā)明涉及醫(yī)藥及食品，具體涉及一種以植物提取的牛蒡多糖為核心活性成分，聯(lián)合殼寡糖、多酚類(lèi)化合物、人參皂苷及多種維生素和礦物質(zhì)的降血糖組合物，及其制備方法和在輔助降低2型糖尿病患者血糖中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、2型糖尿病是一種以胰島素抵抗及胰島素分泌相對(duì)不足為核心病理特征的代謝性疾病，臨床常伴有糖脂代謝紊亂、氧化應(yīng)激增強(qiáng)及多種慢性并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。當(dāng)前臨床常用的口服降糖藥物，包括α-葡萄糖苷酶抑制劑、雙胍類(lèi)、磺脲類(lèi)等，雖在一定程度上能夠控制血糖，但長(zhǎng)期使用易引發(fā)胃腸道不適、肝腎功能損傷等不良反應(yīng)，且藥物成本較高，難以滿(mǎn)足患者長(zhǎng)期用藥的安全性、耐受性與經(jīng)濟(jì)性需求。此外，現(xiàn)有藥物多關(guān)注于即時(shí)或短期的血糖控制，對(duì)于提供平穩(wěn)、長(zhǎng)效的血糖調(diào)節(jié)作用，以減少血糖波動(dòng)帶來(lái)的靶器官損傷，關(guān)注相對(duì)不足。近年來(lái)，源于天然產(chǎn)物的多糖、黃酮類(lèi)化合物及皂苷類(lèi)成分在糖尿病輔助治療領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，成為功能性食品與藥物研發(fā)的重要方向。
2、牛蒡（arctium?lappa?l.）為菊科草本植物，其根中富含菊糖型多糖、黃酮類(lèi)、多酚類(lèi)及揮發(fā)油等多種活性成分，具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、改善腸道菌群等多種生物學(xué)功能。牛蒡多糖（ali）是從牛蒡根中提取的一類(lèi)水溶性低分子量菊糖型果聚糖，研究證實(shí)其具備抑制α-葡萄糖苷酶活性、抗氧化、改善糖脂代謝、保護(hù)肝腎功能等多重藥理活性。特別地，牛蒡多糖作為一種水溶性膳食纖維和多糖，其在體內(nèi)不被上消化道快速吸收，而是通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群、持續(xù)抑制糖苷酶活性以及改善胰島素敏感性等途徑，發(fā)揮長(zhǎng)效、平穩(wěn)的血糖調(diào)節(jié)作用。現(xiàn)有專(zhuān)利如cn202010098242.4涉及牛蒡多糖在非酒精性脂肪肝治療中的應(yīng)用，cn202411292708.9涉及其在制備肺動(dòng)脈高壓藥物中的用途，cn202411821584.9則公開(kāi)了其在認(rèn)知障礙治療方面的潛力等，均未系統(tǒng)研究牛蒡多糖的提取工藝、分子結(jié)構(gòu)與降糖活性的關(guān)聯(lián)，也未見(jiàn)其與殼寡糖、多酚、人參皂苷等成分復(fù)配用于協(xié)同降血糖的報(bào)道，更未見(jiàn)針對(duì)其長(zhǎng)效作用特點(diǎn)進(jìn)行復(fù)方配伍優(yōu)化的研究。
3、殼寡糖（chitooligosaccharides）作為殼聚糖的降解產(chǎn)物，具有良好的水溶性和生物活性，近年來(lái)研究證實(shí)其可通過(guò)多靶點(diǎn)途徑發(fā)揮降血糖作用：殼寡糖能夠通過(guò)激活akt/glut4信號(hào)通路改善hepg2細(xì)胞的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，有效降低2型糖尿病模型小鼠的空腹血糖和血脂水平，改善葡萄糖耐量；殼寡糖還可通過(guò)激活ampk信號(hào)通路、抑制氧化應(yīng)激-纖維化軸及調(diào)節(jié)腸道屏障功能，對(duì)糖尿病腎病等并發(fā)癥發(fā)揮保護(hù)作用。值得注意的是，相較于牛蒡多糖，殼寡糖因其分子量小、水溶性好，可被胃腸道快速吸收，通過(guò)激活關(guān)鍵信號(hào)通路迅速改善外周組織對(duì)葡萄糖的攝取和利用，具有起效快、作用直接的短效降糖特點(diǎn)。然而，現(xiàn)有技術(shù)中尚未有將具有長(zhǎng)效調(diào)節(jié)特性的牛蒡多糖與短效起效的殼寡糖進(jìn)行科學(xué)復(fù)配的報(bào)道。
4、綠原酸是咖啡酸與奎尼酸形成的酯類(lèi)化合物，廣泛存在于金銀花、杜仲等植物中，具有抗氧化、抗炎、調(diào)節(jié)糖脂代謝、改善胰島素抵抗的作用。表兒茶素是茶葉中的主要黃烷醇類(lèi)化合物，具有增強(qiáng)胰島素敏感性、改善血管功能的作用。白藜蘆醇是存在于葡萄、虎杖等植物中的多酚類(lèi)化合物，已被證實(shí)具有激活ampk、改善胰島素抵抗、抗炎抗氧化的功效。人參皂苷rd是人參的主要活性成分之一，具有促進(jìn)胰島素分泌、保護(hù)胰島β細(xì)胞、改善胰島素抵抗的作用。
5、維生素d、b族維生素（b1、b6、b12）是糖代謝關(guān)鍵酶的輔酶，參與能量代謝和神經(jīng)功能維持。鎂離子作為多種酶的輔助因子，參與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和胰島素信號(hào)傳導(dǎo)。甘氨酸鎂具有生物利用度高、胃腸道刺激小的特點(diǎn)。此外，植物提取物常伴有不良風(fēng)味，影響患者長(zhǎng)期服用的依從性。索馬甜蛋白作為天然甜味蛋白，具有高甜度、低熱量、不升高血糖的優(yōu)良特性，適宜用于改善糖尿病功能食品的口感，提升產(chǎn)品可接受度。
6、綜上，現(xiàn)有技術(shù)中缺乏一種以牛蒡多糖為核心長(zhǎng)效成分，以殼寡糖為短效協(xié)同成分，并聯(lián)合多種天然活性產(chǎn)物及營(yíng)養(yǎng)素的降血糖組合物，以克服現(xiàn)有降糖產(chǎn)品在作用時(shí)效單一、協(xié)同性不足、營(yíng)養(yǎng)支持不全面等方面的缺陷。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明旨在提供一種以牛蒡多糖為核心長(zhǎng)效成分、以殼寡糖為短效協(xié)同成分，聯(lián)合綠原酸、表兒茶素、白藜蘆醇、人參皂苷rd及多種維生素和礦物質(zhì)的降血糖組合物，以實(shí)現(xiàn)快速降糖與平穩(wěn)控糖的有機(jī)結(jié)合，克服現(xiàn)有降糖產(chǎn)品作用時(shí)效單一的缺陷。
2、本發(fā)明提供的一種含牛蒡多糖的用于降低2型糖尿病患者血糖的組合物，由活性成分和輔料組成；所述活性成分包括牛蒡多糖、殼寡糖、綠原酸、表兒茶素、白藜蘆醇和人參皂苷rd；所述輔料包括維生素d、維生素b1、維生素b6、維生素b12、甘氨酸鎂和索馬甜蛋白。
3、優(yōu)選地，所述組合物中各組分按重量份計(jì)為：牛蒡多糖?30～70份；殼寡糖?10～40份；綠原酸?5～15份；表兒茶素?3～12份；白藜蘆醇?2～10份；人參皂苷rd?1～8份；維生素d0.001～0.01份；維生素b1?0.01～0.1份；維生素b6?0.01～0.1份；維生素b12?0.0001～0.002份；甘氨酸鎂?0.5～2份；索馬甜蛋白?0.1～2份。
4、進(jìn)一步地，按重量份計(jì)，各組分含量為：牛蒡多糖?50份；殼寡糖?25份；綠原酸?10份；表兒茶素?8份；白藜蘆醇?6份；人參皂苷rd?5份；維生素d?0.005份；維生素b1?0.05份；維生素b6?0.05份；維生素b12?0.0008份；甘氨酸鎂?1份；索馬甜蛋白?0.5份。
5、優(yōu)選地，所述殼寡糖的分子量為1000～2000?da。
6、進(jìn)一步地，所述殼寡糖的分子量為1500?da。
7、優(yōu)選地，所述牛蒡多糖通過(guò)以下方法制備：
8、s1、取新鮮牛蒡根，洗凈后于90～100℃熱水中燙漂3～8分鐘，去皮，切段，壓榨，分別收集榨汁和牛蒡渣；
9、s2、按固液比1:10～1:30（g/ml），向牛蒡渣中加入50～80℃熱水，浸提20～40分鐘，趁熱進(jìn)行第二次壓榨，重復(fù)1～2次；
10、s3、合并所有提取液，離心過(guò)濾，濾液濃縮至原體積的1/5～1/10，加入2～4倍體積的95％乙醇，于4℃靜置12-18小時(shí)，離心收集沉淀；
11、s4、將沉淀復(fù)溶于水，加入0.5％～1.5％（w/v）的木瓜蛋白酶，于ph?6.0～6.5、55℃酶解3小時(shí)，煮沸10分鐘滅酶，離心去除沉淀，上清液用sevage試劑振蕩處理1～2次，然后用d101大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色處理；
12、s5、將脫色后的多糖溶液稀釋至濃度5～10?g/l，用截留分子量為1000?da的超濾膜進(jìn)行超濾濃縮至原體積的1/3～1/5，然后加入等體積超純水進(jìn)行等體積洗濾，重復(fù)3～4次，收集截留液；截留液經(jīng)減壓濃縮后干燥，即得牛蒡多糖。
13、優(yōu)選地，所述組合物的劑型為粉劑或片劑。
14、本發(fā)明還提供了制備前述組合物的方法，包括以下步驟：
15、（1）按重量份稱(chēng)取牛蒡多糖、殼寡糖、綠原酸、表兒茶素、白藜蘆醇、人參皂苷rd、維生素d、維生素b1、維生素b6、維生素b12、甘氨酸鎂和索馬甜蛋白；
16、（2）將各原料分別粉碎過(guò)80～120目篩；
17、（3）將粉碎后的原料置于混合機(jī)中充分混合至均勻；
18、（4）將混合物料滅菌，按規(guī)格分裝，即得粉劑；或者將混合物料滅菌后壓片，即得片劑。
19、本發(fā)明還提供了以上所述組合物在制備用于降低2型糖尿病患者血糖的藥品或功能性食品中的應(yīng)用。
20、進(jìn)一步地，所述應(yīng)用是組合物在制備具有以下至少一種用途的藥品或功能性食品中的應(yīng)用：降低空腹血糖、改善胰島素抵抗、改善糖耐量、降低血脂、降低炎癥因子水平、減輕氧化應(yīng)激損傷。
21、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：
22、（1）本發(fā)明以牛蒡多糖為核心長(zhǎng)效活性成分，通過(guò)抑制α-葡萄糖苷酶、調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)、抗氧化、抗炎及改善糖脂代謝的持續(xù)性作用，發(fā)揮平穩(wěn)、長(zhǎng)效的降血糖效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，牛蒡多糖單用即可使糖尿病模型大鼠空腹血糖由模型組的23.13?mmol/l降至16.45mmol/l（p＜0.05），體現(xiàn)了其長(zhǎng)期基礎(chǔ)控糖能力；
23、（2）本發(fā)明創(chuàng)造性地引入殼寡糖作為短效活性組分，與牛蒡多糖形成“長(zhǎng)短效協(xié)同”的降糖新模式。殼寡糖分子量小、水溶性好，可被機(jī)體快速吸收并激活akt/glut4和ampk等關(guān)鍵信號(hào)通路，即時(shí)改善胰島素抵抗和促進(jìn)葡萄糖攝取，彌補(bǔ)了牛蒡多糖起效相對(duì)緩慢的不足，實(shí)現(xiàn)快速降糖與長(zhǎng)期維穩(wěn)的有機(jī)結(jié)合。在口服葡萄糖耐量試驗(yàn)中，本發(fā)明組合物中等劑量組在灌胃葡萄糖后120?min血糖值為15.41?mmol/l，顯著低于模型組的22.83?mmol/l（p＜0.01），血糖曲線下面積亦顯著降低，展現(xiàn)出優(yōu)異的餐后血糖處理能力；
24、（3）本發(fā)明聯(lián)合綠原酸、表兒茶素、白藜蘆醇等多酚類(lèi)化合物以及人參皂苷rd，通過(guò)多靶點(diǎn)協(xié)同增強(qiáng)降血糖、改善胰島素抵抗、調(diào)節(jié)血脂、抗炎抗氧化的綜合效果。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，與牛蒡多糖單用組相比，本發(fā)明組合物中等劑量組在改善胰島素抵抗指數(shù)（homa-ir降低60.71%）、提升胰島素敏感性指數(shù)（isi升高131.37%）、降低血清總膽固醇、甘油三酯和游離脂肪酸水平，以及降低炎癥因子超敏c反應(yīng)蛋白（hs-crp）、α-腫瘤壞死因子（tnf-α）、白介素-6（il-6）等方面均表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著優(yōu)勢(shì)（p＜0.05或p＜0.01）。體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)，本發(fā)明組合物的α-葡萄糖苷酶抑制活性（ic50=0.3189?mg/ml）顯著優(yōu)于單一牛蒡多糖（ic50=0.4651?mg/ml）和陽(yáng)性對(duì)照阿卡波糖，表明各組分之間存在協(xié)同增效作用；
25、（4）本發(fā)明全面補(bǔ)充糖尿病患者易缺乏的營(yíng)養(yǎng)素，b族維生素（b1、b6、b12）作為糖代謝關(guān)鍵酶的輔酶參與能量代謝，維生素d改善胰島素敏感性，甘氨酸鎂作為胰島素輔助因子參與葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)和胰島素信號(hào)傳導(dǎo)，且生物利用度高、胃腸道刺激??；
26、（5）本發(fā)明采用索馬甜蛋白作為天然甜味蛋白，與植物提取物配合使用，可顯著改善組合物的不良風(fēng)味，提高患者長(zhǎng)期服用的依從性，且不引起血糖升高?？诟性u(píng)價(jià)試驗(yàn)顯示，添加索馬甜蛋白后口感評(píng)分由4.1±0.8分提升至8.9±1.6分，接受度大幅提高；
27、（6）本發(fā)明組合物可制備為粉劑或片劑，劑型便于服用、易于攜帶，適合糖尿病患者長(zhǎng)期使用。
28、綜上，本發(fā)明的降血糖組合物通過(guò)“長(zhǎng)效+短效”協(xié)同、多成分多靶點(diǎn)多通路整合調(diào)節(jié)、營(yíng)養(yǎng)素系統(tǒng)補(bǔ)充及口感優(yōu)化，提供了一種比現(xiàn)有技術(shù)更全面、更有效的輔助降血糖解決方案。