本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用，尤其涉及靶向沉默nat10基因的寡核苷酸在逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類藥物耐藥性、抑制腫瘤細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
1、肺癌是全球最常見的惡性腫瘤之一，也是癌癥相關(guān)死亡的主要原因。非小細(xì)胞肺癌（non-small?cell?lung?cancer，nsclc）約占全球肺癌病例的85%，是目前全球癌癥相關(guān)死亡的首要原因，嚴(yán)重威脅人類生命健康。臨床實踐中，盡管晚期nsclc患者初始接受一線化療時通常可獲得一定治療應(yīng)答，但多數(shù)患者會在治療后一年內(nèi)出現(xiàn)獲得性耐藥或腫瘤復(fù)發(fā)，導(dǎo)致化療療效不佳、患者總體生存率偏低，這已成為制約nsclc臨床治療效果的關(guān)鍵難題。此外，傳統(tǒng)化療藥物存在全身毒性強、靶向性欠佳等固有缺陷，給藥后易對機(jī)體健康組織造成嚴(yán)重?fù)p傷，引發(fā)一系列不良反應(yīng)，進(jìn)一步降低患者治療耐受性，限制了其臨床應(yīng)用。因此，尋找nsclc治療的新靶點、開發(fā)可精準(zhǔn)靶向肺部病變的藥物輸送相關(guān)技術(shù)，對于研發(fā)針對耐藥性nsclc的精準(zhǔn)治療策略、改善患者預(yù)后，具有重要的臨床意義和研究價值，也是當(dāng)前生物醫(yī)藥領(lǐng)域針對肺癌治療的研究熱點和迫切需求。
2、鉑類藥物是目前非小細(xì)胞肺癌化療的一線基礎(chǔ)藥物，憑借廣譜的抗腫瘤活性，在nsclc的治療中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，可有效抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，延長患者生存期。但臨床治療中發(fā)現(xiàn)，約50%以上的晚期nsclc患者在接受鉑類藥物化療后會逐漸產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致化療效果下降、腫瘤復(fù)發(fā)或進(jìn)展，成為制約nsclc化療療效的主要瓶頸。非小細(xì)胞肺癌鉑類化療耐藥性的產(chǎn)生，通常與腫瘤細(xì)胞dna損傷修復(fù)能力增強、脂質(zhì)代謝異常激活密切相關(guān)，這也是導(dǎo)致化療失敗、腫瘤復(fù)發(fā)進(jìn)展的核心原因之一。
3、rna乙酰轉(zhuǎn)移酶nat10（n-acetyltransferase?10,?nat10）作為目前鑒定的唯一同時具有乙酰化酶結(jié)構(gòu)域和rna結(jié)合結(jié)構(gòu)域的蛋白，可調(diào)控mrna的n4位乙酰胞嘧啶修飾水平，進(jìn)而影響mrna的穩(wěn)定性及翻譯效率，參與調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化、凋亡等多種生理病理過程。近年來研究發(fā)現(xiàn)，nat10在多種惡性腫瘤中均呈現(xiàn)異常高表達(dá)狀態(tài)，其高表達(dá)與腫瘤患者不良預(yù)后、腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)展密切相關(guān)；進(jìn)一步研究證實，nat10可通過同時調(diào)控dna損傷修復(fù)能力增強及脂質(zhì)代謝異常激活，參與腫瘤化療耐藥的調(diào)控過程，因此，nat10已成為克服腫瘤化療耐藥性的一類極具潛力的可藥物化靶點。
4、反義寡核苷酸（antisense?oligonucleotides,?asos）是一類極具應(yīng)用前景的核酸類藥物，其核心作用機(jī)制為通過與靶基因rna進(jìn)行序列特異性雜交，特異性抑制靶基因的表達(dá)及功能發(fā)揮，進(jìn)而實現(xiàn)對腫瘤等疾病的治療。與傳統(tǒng)化療藥物相比，asos具有靶向性高、治療靶點范圍廣、藥物開發(fā)流程簡便等顯著優(yōu)勢，在基因治療領(lǐng)域展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。基于此，靶向nat10基因的asos成為逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌化療耐藥性的重要研究方向，但其臨床應(yīng)用受到顯著限制：盡管asos可選擇性沉默nat10基因表達(dá)，但其在體內(nèi)代謝過程中易被肝臟、腎臟快速清除，導(dǎo)致肺部病變部位的藥物濃度難以達(dá)到有效治療水平，無法充分發(fā)揮其逆轉(zhuǎn)化療耐藥的治療效果，因此，開發(fā)可實現(xiàn)反義寡核苷酸高效靶向輸送至肺部病變部位的藥物載體，成為突破這一技術(shù)瓶頸的關(guān)鍵。
5、信使核糖核酸（messenger?rna,?mrna）療法在臨床應(yīng)用中已證實具有良好的安全性和有效性，其中脂質(zhì)納米顆粒（lipid?nanoparticles,?lnps）是目前mrna遞送的主要非病毒載體平臺。但傳統(tǒng)脂質(zhì)納米顆粒（lnps）存在明顯的組織靶向缺陷：全身給藥后，藥物主要在肝臟部位積累，難以靶向遞送至肺部；而霧化型lnps在應(yīng)用過程中，易受氣溶膠化產(chǎn)生的剪切應(yīng)力影響，且易被肺部黏液屏障捕獲，導(dǎo)致其在肺部的遞送效率低下、治療效果不佳，這也凸顯了對lnps配方進(jìn)行優(yōu)化修飾，以適配肺部核酸藥物（包括asos）遞送需求的必要性。
6、盡管近年來相關(guān)領(lǐng)域研究取得一定進(jìn)展，通過特定設(shè)計的lnps配方可實現(xiàn)部分肺部靶向遞送，但此類肺靶向lnps的遞送效力仍有待提升，且其廣泛適用性仍需進(jìn)一步研究驗證，無法滿足靶向nat10的asos在肺部病變部位高效遞送的臨床需求。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
2、為實現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
3、2、根據(jù)權(quán)利要求所述的基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用，其特征在于優(yōu)選的技術(shù)方案為，所述寡核苷酸的序列為：5’aaatagcttcacaactttgc-3’。
4、由于上述技術(shù)方案運用，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有的優(yōu)點是：
5、1、本發(fā)明具有靶向性強、特異性高優(yōu)點：本發(fā)明提供的反義寡核苷酸能夠通過堿基互補配對原則，與nat10基因mrna特異性結(jié)合，精準(zhǔn)抑制nat10基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯，下調(diào)nat10蛋白表達(dá)，脫靶效應(yīng)低，能夠特異性靶向非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥細(xì)胞，減少對正常細(xì)胞的損傷，安全性良好。
6、2、逆轉(zhuǎn)耐藥效果顯著：本發(fā)明的反義寡核苷酸能夠有效逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞對鉑類藥物的耐藥性，顯著降低鉑類藥物對耐藥細(xì)胞的ic50值，增強鉑類藥物對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用，為臨床中鉑類藥物逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌時因耐藥性導(dǎo)致治療效果不佳的問題提供了有效解決方案。
7、3、協(xié)同抗腫瘤作用突出：本發(fā)明的反義寡核苷酸與鉑類藥物聯(lián)合使用時，具有顯著的協(xié)同增效作用，不僅能夠增強鉑類藥物的抗腫瘤活性，還能減少鉑類藥物的用量，降低鉑類藥物的毒副作用，提高臨床治療的安全性和耐受性。
8、4、本發(fā)明的反義寡核苷酸除了逆轉(zhuǎn)鉑類耐藥外，還能抑制非小細(xì)胞肺癌耐藥細(xì)胞的增殖，細(xì)胞增殖實驗證實，處理后抑制了化療耐藥細(xì)胞的增殖；調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞脂代謝異常,脂滴染色證實，處理后細(xì)胞脂滴數(shù)量顯著減少，同時在動物實驗中能夠顯著抑制腫瘤生長，降低腫瘤組織中nat10的表達(dá)，抑制腫瘤的惡性進(jìn)展和轉(zhuǎn)移，發(fā)揮抗腫瘤作用。
1.基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求所述的基于nat10基因的寡核苷酸在制備逆轉(zhuǎn)非小細(xì)胞肺癌鉑類耐藥性的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述寡核苷酸的序列為：5’?aaatagcttcacaactttgc-3’。