本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)及其在制備治療過敏性鼻炎藥物中的應用。
背景技術：
1、外泌體是一類由細胞分泌的具有脂質雙分子層結構的囊泡，其直徑范圍為30~150nm。這種獨特的結構使其能夠攜帶多種生物活性物質，包括蛋白質、mrna、microrna以及脂質等。外泌體在免疫應答、細胞通訊、組織穩(wěn)態(tài)維持以及組織再生等方面發(fā)揮著核心作用，作為細胞間信息傳遞的重要媒介，能夠攜帶的生物活性物質傳遞至靶細胞。
2、間充質基質細胞（msc）外泌體，因其獨特的來源和生物學特性而備受關注。臍帶msc外泌體可以通過膜融合或內吞作用等多種方式，將其所攜帶的活性物質精準地轉運至靶細胞內部對靶細胞的功能進行精細調控。
3、過敏性鼻炎作為一種常見的上呼吸道慢性炎癥性疾病，其典型臨床表現包括連續(xù)性噴嚏發(fā)作、大量清水樣鼻涕分泌、鼻塞以及鼻癢等癥狀。目前臨床上針對過敏性鼻炎的治療仍以藥物治療為主。然而，長期使用藥物不僅會使患者面臨多種不良反應的風險，如鼻腔干燥、出血、頭痛、嗜睡等，還給患者帶來沉重的經濟負擔。更為棘手的是，現階段臨床上尚未發(fā)現一種能夠根治過敏性鼻炎的有效藥物。并且，隨著治療時間的延長，部分患者會出現抗藥性以及對藥物的耐受現象，這使得藥物治療的效果大打折扣，進一步增加了疾病治療的難度?；谏鲜銮闆r，積極探尋一種更為安全、有效的過敏性鼻炎治療方案，對于提高患者的生活質量、減輕其經濟負擔以及提高疾病的治療效果，都具有至關重要的現實意義和臨床價值。
技術實現思路
1、為解決上述技術問題，本發(fā)明基于外泌體的特性研制獲得含有薯蕷皂苷元酮的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，建立過敏性鼻炎小鼠模型，評估不同臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)的療效，動物試驗結果表明本發(fā)明制備的遞送系統(tǒng)顯著改善過敏性鼻炎小鼠的撓鼻和打噴嚏癥狀，顯著抑制促炎因子il-4的過度表達，同時回調抗炎因子il-10，避免免疫紊亂，為過敏性鼻炎的治療提供了一種安全、有效的新方案。
2、一方面，本發(fā)明提供一種臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)的制備方法，該方法，包括以下步驟：采集臍帶組織，清洗后切割為組織塊，接種于含有薯蕷皂苷元酮的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，收集細胞培養(yǎng)上清，從細胞培養(yǎng)上清中分離提取得到臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)。
3、進一步地，所述的制備方法中，所述培養(yǎng)基中含有0.01wt%~0.1wt%的薯蕷皂苷元酮。
4、進一步地，所述的制備方法中，所述培養(yǎng)基中含有0.05wt%的薯蕷皂苷元酮。
5、進一步地，所述的制備方法中，所述分離提取的方法為：將細胞培養(yǎng)上清離心去除細胞和細胞碎片，然后使用超濾管進行超濾濃縮，即得。
6、進一步地，所述的制備方法中，所述離心的條件為3000~4000g/min離心20~30min；所述超濾的條件為3000~3500g/min室溫離心35~40min。
7、又一方面，還提供本發(fā)明所述的制備方法制得的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)。
8、進一步地，所述臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，抑制促炎因子il-4的表達，提高抗炎因子il-10的表達。
9、再一方面，還提供一種藥物組合物，該組合物包含本發(fā)明所述的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，以及藥學上可接受的載體或賦形劑。
10、最后，還提供本發(fā)明所述的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)在制備治療過敏性鼻炎藥物中的應用。
11、進一步地，所述應用中，所述藥物通過調節(jié)鼻黏膜組織中il-4和il-10的mrna表達水平，緩解過敏性鼻炎癥狀。
12、與現有技術相比，本發(fā)明提供的技術方案至少具備下述的有益效果或優(yōu)點：
13、（1）本發(fā)明首次公開了通過在臍帶間充質基質細胞（msc）的培養(yǎng)基中添加特定濃度的薯蕷皂苷元酮，制備出對過敏性鼻炎具有治療效果的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)。動物實驗結果表明，本發(fā)明制備的遞送系統(tǒng)顯著抑制促炎因子il-4的過度表達，同時適度回調抗炎因子il-10表達水平，有效避免因il-10過度代償導致的免疫紊亂。
14、（2）本發(fā)明發(fā)現當培養(yǎng)基中薯蕷皂苷元酮的濃度處于特定范圍（0.01wt%~0.1wt%），特別是0.05wt%時，制得的外泌體治療效果最佳。且單純使用薯蕷皂苷元酮溶液幾乎無效。表明本發(fā)明的技術方案產生了協(xié)同增效作用。
15、（3）本發(fā)明制備的遞送系統(tǒng)源自臍帶msc外泌體，具有良好的生物相容性和低免疫原性，安全性高。其在動物模型中表現出的優(yōu)異療效，以及明確的作用機制，為其臨床應用奠定了堅實的基礎，為過敏性鼻炎提供了一種安全、有效的全新治療方案。
1.一種臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：采集臍帶組織，清洗后切割為組織塊，接種于含有薯蕷皂苷元酮的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，收集細胞培養(yǎng)上清，從細胞培養(yǎng)上清中分離提取得到臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基中含有0.01wt%~0.1wt%的薯蕷皂苷元酮。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基中含有0.05wt%的薯蕷皂苷元酮。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述分離提取的方法為：將細胞培養(yǎng)上清離心去除細胞和細胞碎片，然后使用超濾管進行超濾濃縮，即得。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述離心的條件為3000~4000g/min離心20~30min；所述超濾的條件為3000~3500g/min室溫離心35~40min。
6.根據權利要求1~5任一項所述制備方法制得的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)。
7.根據權利要求6所述的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，其特征在于，所述臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，抑制促炎因子il-4的表達，提高抗炎因子il-10的表達。
8.一種藥物組合物，其特征在于，包含權利要求6所述的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)，以及藥學上可接受的載體或賦形劑。
9.權利要求6所述的臍帶msc外泌體納米載體遞送系統(tǒng)在制備治療過敏性鼻炎藥物中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述藥物通過調節(jié)鼻黏膜組織中il-4和il-10的mrna表達水平，緩解過敏性鼻炎癥狀。