1.一種分相切口酶介導的先導編輯器,其特征在于,所述先導編輯器為整合了由單個單向導rna引導的cas9切口酶1和cas9切口酶1平臺,包括cas9切口酶1和cas9切口酶2、mmlv逆轉錄酶、la蛋白以及pegrna構成;其中,cas9切口酶1用于實現非靶向鏈的切割,cas9切口酶2用于實現靶向鏈切割,兩者切割的切口是對稱的;所述cas9切口酶1選自以下任一或幾種:
2.根據權利要求1所述的先導編輯器,其特征在于,所述mmlv逆轉錄酶的氨基酸序列如seq?id?no:2所示,所述la蛋白的氨基酸序列如seq?id?no:3所示。
3.權利要求1或2所述的先導編輯器的構建方法,其特征在于,包括如下步驟:
4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,構建grna的酶切酶連體系包含ec3il酶、t4連接酶、t4連接酶緩沖液和bsa,所述pe7max:pegrna:cas9切口酶2的質量比=(2-6):(1-2):(1-1.5)。
5.一種分相切口酶介導的先導編輯系統,其特征在于,包含權利要求1或2任一所述的先導編輯器。
6.一種真核細胞中基因編輯的方法,其特征在于,所述方法為非疾病診斷和治療目的的方法,將權利要求1或2所述的先導編輯器、或權利要求5所述的先導編輯系統對細胞進行轉染,轉染過程中加入opti培養基和pei,使dna:pei質量比為1:2~10,轉染結束后收集細胞沉淀,得到基因編輯的細胞。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,dna:pei質量比為1:3~5;所述真核細胞是hek293t細胞;
8.權利要求1或2所述先導編輯器或權利要求5所述先導編輯系統在提高基因組先導編輯效率中的應用。
9.權利要求1或2所述先導編輯器或權利要求5所述先導編輯系統在降低基因組先導編輯過程中插入缺失副產物比例中的應用。