本發明屬于黃芪生態種植技術領域，具體涉及一種黃芪拌種劑及其促進黃芪生長和黃芪根黃酮類化合物積累的方法，采用內生菌pseudomonaspoae菌株ksc02拌種，促進干旱脅迫條件下黃芪根生物量和根冠比的增加，以及藥用部位根中黃酮類活性成分芒柄花苷和毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量的增加。
背景技術：
現有研究表明，內生菌通過合成植物生長激素吲哚乙酸（indoleaceticacid,iaa）、利用植物體內乙烯合成前體—1-氨基環丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane-1-carboxylicacid,acc）作為碳源等方式，在植物生長、次生代謝物質合成積累及緩解環境脅迫等方面發揮著積極作用。針對內生菌在藥用植物中的作用，國內外學者也進行了探索性研究，如已有研究發現，茅蒼術內生細菌熒光假單胞菌具有促進蒼術內酯合成與積累的作用；內生菌銅綠假單胞菌pseudomonasaeruginosa具有促進牛膝生長的作用；內生真菌trichodermaatroviride具有促進丹參毛狀根生長及丹參酮積累的作用；內生真菌菌株gilmaniellasp.al12具有促進蒼術倍半萜合成的作用；青蒿內生菌假諾卡氏菌屬(pseudonocardia)菌株具有誘導青蒿素合成的作用。挖掘藥用植物促生內生菌資源及其促生特征，解決目前中藥材栽培中普遍存在的農藥殘留、藥材品質下降等問題，是中藥材種植業穩定、持續發展與利用的關鍵之一。
黃芪來源于豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，屬常用補益類大宗藥材，具有補氣固表、利水退腫、托毒排膿、生肌等功效。鑒于黃芪野生資源的匱乏和全民醫療保健意識的提高，目前市售黃芪多為栽培品。通過分析不同產地黃芪根內生菌群結構與組成，前期研究發現渾源黃芪細菌多樣性遠高于其他產地黃芪，且存在很多獨特的細菌分類單元。進一步挖掘黃芪內生菌資源，應用于黃芪生態種植，對于黃芪種植產業的發展和黃芪資源持續利用具有重要意義。
合成植物激素吲哚乙酸（indoleaceticacid，iaa）是一大類植物促生菌共有特性之一，該類菌株在生長介質中含有色氨酸時，可以合成iaa并分泌至胞外，進而促進宿主植物的生長。在鹽、干旱和土壤過度酸堿脅迫條件下，植物生長會受到抑制。分析脅迫條件下菌株iaa產生特征，選出促進iaa產生的脅迫因子，研究該脅迫因子作用下接種促生菌對宿主植物黃芪生長與活性成分積累特征，挖掘具有緩解環境脅迫、促進植物生長與活性成分積累的有益菌株，將有助于將該菌株應用于黃芪種植業。
技術實現要素：
本發明為了解決目前黃芪栽培、品質改善的問題，提供了一種黃芪拌種劑及其促進黃芪生長和黃芪根黃酮類化合物積累的方法，促進干旱脅迫條件下黃芪品質提高與產量提高。
本發明由如下技術方案實現的：一種黃芪拌種劑，由黃芪內生菌株草假單胞菌（pseudomonaspoae）菌株ksc02發酵制備而成，具體制備方法為：草假單胞菌（pseudomonaspoae）菌株ksc02制備成種子培養物，按照1‰接種量轉接于lb液體培養基中，28℃、180rpm搖床培養過夜,培養物4℃、8000rpm離心10min，收集菌體沉淀；300mmmgcl2洗滌菌體沉淀2次后，重新懸浮菌體沉淀于mgcl2溶液中，并調整od600至1.0，制備得拌種劑,4℃保存備用。
所述黃芪內生菌株草假單胞菌（pseudomonaspoae）菌株ksc02于2017年11月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為cgmccno.14946，菌種來源于黃芪鮮藥材。該菌株為具有吲哚乙酸合成活性的內生菌株。
所述種子培養物的制備方法為：挑取保存在-80℃的草假單胞菌菌株培養物少許，在lb固體平板中劃線、28℃培養24-48h，取單菌落繼續劃線培養1次活化菌株；挑取第二次活化菌株單菌落，轉接于lb液體培養基，28℃搖床培養至對數生長晚期，即od600為1.8～2.0，獲得種子培養物。
利用所述的黃芪拌種促進黃芪生長和黃芪根黃酮類化合物積累的方法，具體方法為：將黃芪種子與所述黃芪拌種劑按照濕重/g：體積/ml為3：20的比例混合后孵育黃芪種子90分鐘，置于含無菌濾紙的培養皿中萌發，待兩片真葉完全展開后，轉移至無菌基質中光照培養4周；4周后用20%的peg6000連續澆灌幼苗3周。
本發明所述黃芪拌種用細菌菌株為申請號為201810199611.1，發明名稱為《黃芪促生內生菌及其促生長方法與應用》中所記載的分離方法。
所述的黃芪促生菌在鹽、干旱及酸堿脅迫條件下促進植物生長激素iaa產生；在干旱脅迫條件下黃芪生長及異黃酮活性成分積累中的應用。
本發明涉及的內生菌株：分離自黃芪道地藥材—5年生渾源黃芪，應用于黃芪拌種，不存在二次污染問題；拌種促進黃芪生長及異黃酮類化合物積累應屬道地藥材適應棲息地干旱少雨的氣候與土壤特征，屬于緩解環境脅迫需要的生態適應特征，為中藥材黃芪種植提供了一種綠色、無藥材殘留的環境友好型生物菌劑。
黃芪藥材，目前以栽培為主，田間管理普遍存在噴施化學合成農藥控制病蟲害、施用化學合成肥料促進生長等現象，不僅容易造成農藥殘留量超標、質量下降，同時也造成土壤污染、板結和肥力下降等，不利于黃芪種植業的綠色發展。本發明所確定的拌種菌劑—草假單胞菌菌株ksc02，分離自5年生道地黃芪藥材—渾源黃芪新鮮根部，應用于黃芪拌種，不存在二次污染的問題。此外，在甜菜、生菜、人參等經濟/藥用植物中的研究還發現，草假單胞菌除具有促生作用外，還具有拮抗致病性細菌、真菌生長及解磷活性。
在含7%nacl、20%peg6000及ph值為5.0的lb培養基上首先考察了鹽度、干旱脅迫及酸堿度對該菌株生長及產生植物生長激素—吲哚乙酸（indoleaceticacid,iaa）的影響。在此基礎上，制備菌體懸液與黃芪種子共同孵育，待幼苗生長出3～4片真葉后，20%peg6000模擬干旱脅迫處理幼苗三周。通過分析黃芪生長與活性成分含量，發現該菌株具有促進干旱脅迫條件下黃芪幼苗生長與活性成分積累的作用。
本發明涉及的黃芪拌種菌劑，還具有耐鹽、耐酸堿等生物活性。渾源黃芪屬道地藥材，渾源屬干旱、半干旱產區，產地土壤電導率介于39～44us/cm之間、ph值在8.05～8.29之間，植物生長也存在鹽與堿性脅迫。耐鹽堿及干旱特性，該菌株拌種顯著提高了脅迫條件下黃芪產量和質量，有望開發為綠色農藥，起到提高藥材品質與產量、降低化學合成農藥和肥料的雙重作用。栽培黃芪的田間管理，亟待尋求環境友好型生長促進劑取代化學合成肥料、殺蟲劑等，以應對黃芪種植中存在的上述問題，同時也有利于黃芪藥用資源的持續開發利用。
附圖說明
圖1為脅迫條件對草假單胞菌ksc02生長(a、b、c)的影響；圖中：a為鹽脅迫的影響；b為干旱脅迫的影響；c為酸堿度脅迫的影響；柱狀圖標準偏差上的不同字母代表組間顯著性差異。圖2為極端脅迫條件下草假單胞菌ksc02生長（ａ）與iaa產生（b）特征；圖中：橫坐標為培養時間點，具體包括接種后5、9、13、17和30小時，a中縱坐標為od600,b中縱坐標為iaa濃度。圖3為草假單胞菌ksc02拌種和20%peg6000單獨處理及二者共同作用對黃芪生長的影響；圖中：a為株高（厘米），b為莖葉鮮重（克），c為根鮮重（克），d為根冠比；mgcl2和ksc02分別為溶劑對照和ksc02單獨處理組；20%peg6000、20%peg6000&mgcl2和20%peg6000&ksc02分別為peg6000單獨處理、peg6000分別與溶劑對照和ksc02合并處理組；柱狀圖標準偏差上的不同字母代表組間顯著性差異。圖4為草假單胞菌ksc02拌種、20%peg6000單獨處理及二者合并處理對黃芪幼苗根中活性成分積累的影響，圖中：a為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，b為芒柄花苷，c為黃芪皂苷ⅳ；柱狀圖標準偏差上的不同字母代表組間顯著性差異。圖5為草假單胞菌ksc02、20%peg6000單獨處理及二者合并處理對黃芪根活性成分合成量的影響，圖中：a為毛蕊異黃酮葡萄糖苷，b為芒柄花苷，c為黃芪皂苷ⅳ；柱狀圖標準偏差上的不同字母代表組間顯著性差異。圖6為草假單胞菌ksc02、20%peg6000單獨處理及二者合并處理對黃芪幼苗成熟葉片、根脂質過氧化的影響，以丙二醛（malondialdehyde，mda）為評價指標，用于評價脂質過氧化程度；圖中：a為成熟葉片，b為根；柱狀圖標準偏差上的不同字母代表組間顯著性差異。
具體實施方式
實施例1：黃芪內生菌草假單胞菌ksc02分離與促生特征篩選
以山西渾源5年生黃芪鮮根為材料，采用組織塊分離法分離黃芪內生菌。具體操作如下：將采回的鮮黃芪用自來水沖洗若干次，洗去殘留在根表泥土，緊接著用含10%吐溫-20的無菌水沖洗；在無菌條件下，將黃芪根切成1cm長的小段，置于75%酒精中浸泡1min，無菌水沖洗3次，放入5%次氯酸鈉中浸泡10min，無菌水沖洗3次，然后放入75%酒精中漂洗40s，無菌水沖洗5次，用無菌濾紙吸去多余水分，將處理好的材料置于無菌研砵中，加入2ml生理鹽水搗碎，研磨。
取100μl上清液涂布于lb固體培養基（培養基配方：蛋白胨1.0g、酵母粉0.5g、nacl1.0g、瓊脂粉1.5克，溶于100ml蒸餾水中，ph7.2）平板，28℃避光培養2d。同時將最后一次無菌水洗液作為對照，若沒有任何菌落長出，證明材料表面消毒徹底，分離到的菌為黃芪內生菌。
內生菌的純化：根據菌落長出時間、形態及色澤，挑選代表性菌落轉接于新的lb固體培養基平皿，進行純化培養，經幾次轉接后得到菌落形態完全一致的單菌落即視為純化后的內生菌。將純化好的內生菌進行編號，然后轉接于lb液體培養基中28℃培養至對數生長期，無菌條件下，將菌液與滅菌甘油混合均勻，甘油終濃度為20%，置于-80℃冰箱內保存。
參照文獻（姜曉宇，高菊生，徐鳳花，曹艷花，唐雪，張曉霞.水稻種子內生細菌多樣性及其分泌植物生長素能力的測定.微生物學報,2013,53(3):269-275），定性判斷草假單胞菌ksc02是否含acc脫氨酶。具體操作如下：將冰箱中保存的菌種劃線接種于lb固體培養基，28℃培養過夜，選取單菌落再劃線培養一次，挑取單菌落轉接到adf固體平板，采用劃線法連續傳代5次，仍能正常生長者，說明含acc脫氨酶。
df鹽培養基配方：kh2po44.0g，na2hpo46.0g，mgso4·7h2o0.2g，葡萄糖2.0g，葡萄糖酸鈉2.0g，檸檬酸2.0g，(nh4)2so42.0g，組分1、組分2各0.1ml，h2o1000ml，ph7.2。其中組分1的配方為：h3bo410mg，mnso4·h2o11mg，znso4·7h2o124.6mg，cuso4·5h2o78.2mg，moo310.0mg，溶于100ml滅菌水中；組分2的配方為：feso4·7h2o100.0mg溶于10ml滅菌水中，將配置好的組分1、組分2置于4℃保存，備用。
adf培養基：將acc溶于超純水，用無菌濾膜過濾除菌后，加入不含(nh4)2so4的df鹽培養基中，其中，acc的終濃度為3.0mmol/l。在lb培養基上：草假單胞菌菌株ksc02菌落呈淺黃色，表面光滑，邊緣整齊，隨培養時間延長，菌落中心顏色加深，呈土黃色，lb培養基連續傳代5次，產色素性能穩定；革蘭氏陰性，菌體呈短桿狀。草假單胞菌ksc02形態學信息見表1。
利用不含(nh4)2so4的df鹽固體培養基，連續傳代5次，仍能生長者，具有固氮活性。接種與培養條件與含acc脫氨酶菌株篩選方法相同。
表1草假單胞菌ksc02形態學信息
實施例2：環境脅迫對草假單胞菌ksc02生長的影響
挑取分離、純化、鑒定并保存在-80℃的草假單胞菌菌株，首先在luria-bertani（lb）固體平板中劃線、28℃培養，取單菌落繼續劃線培養1次，以活化菌株。挑取第二次活化菌株單菌落，轉接于lb液體培養基，28℃搖床培養至對數生長晚期（od600介于1.8～2.0之間），獲得種子培養物。按照1‰接種量接種上述培養物于含1%、2%、3.5%、5.0%及7%nacl的lb液體培養基中，以不添加nacl者作為陰性對照，每個濃度三個平行，搖床28℃培養過夜,轉速180rpm，取部分培養物直接進行od600測定，獲得菌體生長數據，。以nacl濃度為橫坐標，od600為縱坐標，繪制柱狀圖，分析nacl濃度對菌株ksc02生長的影響。利用graphpadprism7.01軟件進行組間差異顯著性分析，閾值設定為p<0.05。結果見圖1a。從該圖可以看出，不加nacl和添加2%的nacl，od600即ksc02生物量數據顯著高于對照；添加3.5%和5%nacl者，菌株生物量與對照處于同一水平；添加7%的nacl，菌體生物量數據明顯低于對照，即7%nacl對菌株ksc02生長的抑制作用最強。
采用如上所述方法，制備種子培養液。按照1‰接種量接種于含1%、5%、10%、15%和20%peg6000的lb液體培養基中，以不添加peg6000者作為陰性對照，每個濃度三個平行，搖床28℃培養過夜,轉速180rpm，取部分培養物直接進行od600測定,獲得菌株ksc02生長數據。以peg6000濃度為橫坐標，od600為縱坐標，繪制柱狀圖，分析干旱脅迫對菌株ksc02生長的影響,組間差異顯著性分析方法同上。結果見圖1b。從該圖可以看出，培養液中peg6000濃度≤5%時，對菌株ksc02生長影響較小，生物量數據與對照處于同一水平；當peg6000濃度≥10%時，菌株ksc02生長明顯受到抑制，其生物量數據明顯低于對照，其中添加20%peg6000組，生物量數據最小，抑制作用最強。
采用如上方法，制備種子培養物。按照1‰接種量接種于ph值分別為5、7、9的lb液體培養基中，以正常的lb培養基作為對照，每個ph值三個平行，搖床28℃培養過夜,轉速180rpm，取部分培養物直接進行od600測定，獲得生物量數據。以ph值為橫坐標，od600為縱坐標，繪制柱狀圖，分析酸度對菌株ksc02生長的影響，差異顯著性分析方法同上。結果見圖1c。從該圖可以看出，實驗條件下的三個ph值均引起od600的減小，其中ph5.0組降低最為明顯，抑制生長作用最強。
實施例3：草假單胞菌ksc02在極端脅迫條件下生長（ａ）與iaa產生（b）特征
采用實施例2方法制備種子培養物。按照1‰接種量接種于含7%nacl、20%peg6000和ph為5.0已添加1mg/ml色氨酸的lb液體培養基中，以ph值為7.2、含1%nacl的正常lb培養基為對照，28℃搖床培養,轉速180rpm。分別在培養5、9、13、17、30h，測定od600和od530。其中，部分培養物直接用于測定od600；同時取1.5ml培養液與等體積的salkowski顯色劑（10ml0.5mol/lfecl3，500ml35%高氯酸，使用前混合，避光保存）充分混合,室溫條件下避光放置30min,測定od530；以吲哚乙酸為對照品，繪制工作曲線，根據所得的線性回歸方程，計算培養液中吲哚乙酸濃度。以培養時間為橫坐標，od600為縱坐標，繪制散點圖，分析上述極端脅迫條件對菌株ksc02生長的影響。以培養時間為橫坐標，吲哚乙酸含量為縱坐標，繪制散點圖，分析上述極端脅迫條件對菌株ksc02產生吲哚乙酸的影響。每個處理每個時間點三個平行。結果分別見圖2a、2b。從圖2a可以看出，酸脅迫對菌株ksc02生長影響最小，其生物量數據始終高于7%nacl組和20%peg6000組；此外，隨著培養時間的延長，7%nacl組和ph5.0組菌株生長趨勢與正常對照一致，均在培養時間為17h時生物量數據達到最大，而20%peg6000組隨著培養時間的延長，生物量數據持續增大，在檢測時間點生物量未達最高點，提示該菌株耐受20%peg6000能力強，活性佳。從圖2b可以看出，ph5.0組與正常對照組iaa含量幾乎處于同一水平，二者iaa產生模式類似，提示介質酸度對iaa產生影響較小；與對照相比，7%nacl和20%peg6000組iaa合成量顯著降低，但后者隨著培養時間的延長，iaa合成量明顯高于7%nacl組，提示菌株ksc響應20%peg6000合成iaa活性較強。
實施例4：草假單胞菌ksc02拌種和20%peg6000單獨處理及二者共同作用對黃芪生長的影響
拌種劑制備：采用實施例2方法制備種子培養物，并按照1‰接種量轉接于lb液體培養基中，28℃搖床培養過夜,轉速180rpm。無菌轉移過夜培養物至無菌離心管中，4℃、8000rpm離心10min，收集菌體沉淀；300mol/lmgcl2洗滌菌體沉淀2次后，重新懸浮菌體沉淀于mgcl2溶液中，并調整od600至1.0，制備得拌種劑,4℃保存備用。
黃芪種子處理與萌發：首先用75%酒精振搖洗滌種子1min，而后用無菌水洗滌三次；緊接著用5%次氯酸鈉溶液處理20min,無菌水洗滌5～6次；最后50℃水浴條件下孵育種子10min。待種子自然冷卻至室溫，按照3：20（種子質量：拌種劑體積）的用量，加入拌種劑，室溫條件下共同孵育90min。挑取處理后種子于鋪有無菌吸水紙的培養皿中，光照條件下萌發。光照培養條件：溫度為23℃，光周期為16h(光)/8h（暗），光強度為2000～3000lux。注：按照每15g種子中加入100ml75%酒精和5%次氯酸鈉的量，計算消毒劑用量。
拌種劑處理：待子葉完全展開后，轉移萌發后種子于自吸水缽體中，每缽3～4粒種子。缽體基質為滅菌沙壤土與蛭石等體積混合物，前者輻射殺滅微生物，輻射劑量為10kgy；后者121℃30min滅菌。轉移缽體于光照培養箱中光照培養，光周期：16h23℃(光)/8h23℃(暗),無菌水常規澆灌,光照強度1000～5000lux。無任何處理、300mol/lmgcl2處理者分別為正常對照和溶劑對照。
20%peg6000處理及材料收集：光照培養箱生長8周后，選取長勢較為一致的黃芪幼苗進行脅迫處理。正常對照、溶劑對照及ksc02處理組幼苗隨機分為2個亞組，一個亞組作為對照，常規澆以無菌水，另一亞組澆以20%peg6000，連續處理3周。單株收集根、莖葉。稱量并記錄鮮重及株高后，液氮速凍第3-5片葉子和根,-80℃保存。以莖葉鮮重代表地上部分生物量、根鮮重代表地下部分生物量，根鮮重與莖葉鮮重比值代表根冠比。
數據分析：數據以平均值±標準偏差形式表示。利用graphpadprism7.01軟件進行組間差異顯著性分析，閾值設定為p<0.05。有關結果見圖3。從圖3a可以看出，除ksc02單獨處理株高顯著高于對照外，其他組間均無顯著差異；從圖3b可以看出，ksc02單獨處理引起地上部分生物量顯著增加外，peg6000單獨處理、peg6000&mgcl2與peg6000&ksc02共同處理均引起地上部分生物量顯著降低；從圖3c可以看出，除20%peg6000&ksc02共同處理組地下生物生物量顯著增加外，其余組間均無顯著差異；從圖3d可以看出，20%peg6000&ksc02共同處理組根冠比顯著高于其余組別，而ksc02單獨處理導致其根冠比顯著低于對照。概言之，干旱脅迫條件下，ksc02拌種處理黃芪種子具有促進黃芪藥用部分根生物量及根冠比增加的作用。
實施例5：草假單胞菌ksc02拌種和20%peg6000單獨處理及二者共同作用對黃芪根活性成分積累及合成量的影響
利用實施例4盆栽實驗收集的根樣本，進行黃芪皂苷ⅳ、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷含量測定。具體提取與含量測定，參照文獻（孫歡歡，孫海峰，柴智，白云娥，高建平.堿處理在微量黃芪藥材質控指標成分含量測定中的應用研究.藥物分析雜志2018,38(9):1652-1660）方法進行。結果見圖4。從圖4a可以看出，20%peg6000與ksc02拌種共同處理組毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量顯著高于其余組別，而20%peg6000與ksc02拌種單獨處理組毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量與正常對照處于同一水平；從圖4b可以看出，20%peg6000、ksc02拌種單獨處理組以及二者共同處理組芒柄花苷含量均顯著高于正常對照，且二者共同處理組含量略高于單獨處理組；從圖4c可以看出，20%peg6000、ksc02拌種單獨處理組黃芪皂苷ⅳ含量與正常對照處于同一水平，二者共同處理組黃芪皂苷ⅳ含量明顯低于對照。以上結果表明，干旱脅迫條件下，ksc02拌種具有促進黃芪幼苗根毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花苷積累的作用。
鑒于20%peg6000處理可能引起細胞縮水，在活性成分合成量相同情況下，可能存在由于生物量減少而導致的活性成分含量增加；為了排除這種情況，利用實施例4盆栽實驗獲得的根生物量數據，乘以對應的黃芪皂苷ⅳ、毛蕊異黃酮葡萄糖苷、芒柄花苷含量數據，獲得相關物質合成量數據。有關結果見圖5。從圖5a可以看出，20%peg6000與ksc02拌種一起處理組毛蕊異黃酮葡萄糖苷合成量遠高于正常對照及其余組別；從圖5b可以看出，20%peg6000、ksc02拌種單獨處理組芒柄花苷含量與正常對照處于同一水平，二者共同處理組芒柄花苷合成量顯著高于正常對照；從圖5c可以看出，無論是20%peg6000、ksc02拌種單獨處理組，還是二者共同處理組，黃芪皂苷ⅳ合成量與正常對照組處于同一水平。綜上所述，ksc02拌種具有促進干旱脅迫條件下黃芪幼苗根毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花苷積累的作用。
實施例6：草假單胞菌ksc02拌種和20%peg6000單獨處理及二者共同作用對黃芪根、葉脂質過氧化水平的影響
液氮研磨實施例4盆栽實驗收集的根葉材料呈粉末狀，利用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒，根據說明書推薦方法，采用分光光度法測定葉片和根中丙二醛含量。結果見圖6。從圖6a可以看出,20%peg6000單獨處理及溶劑與peg6000共同處理組葉片mda含量與正常對照處于同一水平，而ksc02拌種單獨處理及與20%peg6000共同處理組葉片mda含量顯著高于正常對照，但較溶劑對照組低；從圖6b可以看出，除溶劑與20%peg6000共同處理組根mda顯著降低外，其余處理根mda含量與正常對照均處于同一水平。該結果提示，ksc02拌種與20%peg6000共同處理引起的黃芪根異黃酮活性成分即毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花苷積累增加很可能與葉片組織中中等強度的脂質過氧化水平增加有關，但鑒于ksc02單獨拌種與共同處理組mda處于同一水平，除抗氧化脅迫外，干旱脅迫條件下ksc02促進根生物量增加及毛蕊異黃酮葡萄糖苷和芒柄花苷積累作用還應該有別的機制存在。