本發(fā)明涉及炎性障礙領(lǐng)域。本發(fā)明涉及抗cd30l抗體，以及用所述抗體治療患者。
背景技術(shù)：
1、分化簇30配體（cd30l，也稱為tnfl8，或腫瘤壞死因子配體超家族成員8）是腫瘤壞死因子（tnf）超家族的成員，由tnfsf8基因編碼。cd30l的主要同種型由234個氨基酸的跨膜蛋白組成，其中胞外結(jié)構(gòu)域中具有172個氨基酸。與tnf超家族的標(biāo)志特征之一一致，cd30l組裝成同源三聚體復(fù)合物并與其同源受體cd30（tnfrsf8）結(jié)合。cd30l與cd30結(jié)合后刺激多種通路的激活，這些通路包括絲裂原激活的蛋白激酶（mapk）和核因子κb（nf-kb）信號傳導(dǎo)。與其他tnf超家族成員類似，cd30l和cd30可以在被蛋白酶如tnfa轉(zhuǎn)化酶（tace）切割后從細(xì)胞膜上脫落。cd30l-cd30接合已顯示出能刺激配體和受體兩者的脫落增加。可溶性cd30l（scd30l）可以結(jié)合并刺激cd30信號傳導(dǎo)。
2、cd30l表達(dá)受限于免疫系統(tǒng)。cd30l表達(dá)受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)并且主要在激活的淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞上觀察到。遺傳和藥理學(xué)小鼠模型已經(jīng)揭示了cd30l-cd30信號傳導(dǎo)在調(diào)節(jié)輔助性t細(xì)胞和b細(xì)胞的分化和效應(yīng)子功能中的作用。cd30l信號傳導(dǎo)已顯示出能調(diào)節(jié)泛輔助性t細(xì)胞效應(yīng)子細(xì)胞因子，包括th1、th2和th17。cd30l還顯示出能調(diào)節(jié)b細(xì)胞產(chǎn)生多種同種型類別的抗體。因此，cd30l-cd30信號傳導(dǎo)廣泛地調(diào)節(jié)1型和2型/過敏性適應(yīng)性免疫應(yīng)答。
3、數(shù)條證據(jù)表明cd30l-cd30信號傳導(dǎo)與多種炎性疾病適應(yīng)癥有關(guān)。tnfrsf8（cd30）中罕見的功能喪失遺傳變異與預(yù)防重度哮喘有關(guān)（olafsdottir等人,?naturecommunications?[自然通訊],?2020）。據(jù)報道，幾種疾病適應(yīng)癥（包括哮喘、炎性腸病和多發(fā)性硬化）的血漿或血清中scd30和scd30l水平升高，這表明與這些疾病相關(guān)的通路信號傳導(dǎo)活性的水平較高。無論是通過遺傳模型還是藥理學(xué)模型，小鼠cd30-cd30l信號傳導(dǎo)受損均顯示出能改善小鼠炎性疾病模型的疾病嚴(yán)重程度（參見例如kennedy等人,?immunology[免疫學(xué)].2006年6月;?118(2):143-52）。抗cd30l抗體是已知的（參見例如pct公開號wo2013/163377和pct公開號wo?20221/77963），然而，通過例如具有增加的親和力和/或效力的抗cd30l抗體，在人類患者中對cd30-cd30l信號傳導(dǎo)進(jìn)行替代性治療拮抗可以提供廣泛的臨床益處。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本披露部分地提供了與cd30l結(jié)合的抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?1的hcdr1、含有seq?id?no:?2的hcdr2、含有seq?id?no:?3的hcdr3、含有seq?id?no:?4的lcdr1、含有seq?id?no:?5的lcdr2和含有seq?id?no:?6的lcdr3。在實(shí)施例中，抗體包含：由seq?id?no:?1組成的hcdr1、由seq?id?no:?2組成的hcdr2、由seq?id?no:?3組成的hcdr3、由seq?id?no:?4組成的lcdr1、由seq?id?no:?5組成的lcdr2和由seq?id?no:?6組成的lcdr3。
2、在上述任一項(xiàng)的實(shí)施例中，抗體包含重鏈可變區(qū)（hcvr）和輕鏈可變區(qū)（lcvr），該重鏈可變區(qū)（hcvr）含有seq?id?no:?19或其變體，該變體包含與seq?id?no:?19具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的氨基酸序列；該輕鏈可變區(qū)（lcvr）含有seq?idno:?20或其變體，該變體包含與seq?id?no:?20具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的氨基酸序列。在實(shí)施例中，seq?id?no:?19的變體包含與seq?id?no:?19相關(guān)的不超過6、5、4、3、2或1個氨基酸取代、插入或缺失，并且seq?id?no:?20的變體包含與seq?idno:?20相關(guān)的不超過6、5、4、3、2或1個氨基酸取代、插入或缺失，其中變異發(fā)生在hcvr、lcvr或者h(yuǎn)cvr和lcvr兩者的框架區(qū)中。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?19的hcvr和含有seq?id?no:?20的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含由seq?id?no:?19組成的hcvr和由seq?idno:?20組成的lcvr。
3、在上述任一項(xiàng)的實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?25的重鏈（hc）和含有seqid?no:?26的輕鏈（lc）。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，其中每個hc含有seq?idno:?25，并且每個lc含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，其中每個hc由seq?id?no:25組成，并且每個lc由seq?id?no:26組成。在另一個實(shí)施例中，抗體由兩個hc和兩個lc組成，其中每個hc由seq?id?no:25組成，并且每個lc由seq?id?no:26組成。
4、本披露提供了與cd30l結(jié)合的抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?7的hcdr1、含有seq?id?no:?8的hcdr2、含有seq?id?no:?9的hcdr3、含有seq?id?no:?10的lcdr1、含有seqid?no:?11的lcdr2和含有seq?id?no:?12的lcdr3。在上述任一項(xiàng)的實(shí)施例中，抗體包含由seq?id?no:?7組成的hcdr1、由seq?id?no:?8組成的hcdr2、由seq?id?no:?9組成的hcdr3、由seq?id?no:?10組成的lcdr1、由seq?id?no:?11組成的lcdr2和由seq?id?no:?12組成的lcdr3。
5、在上述任一項(xiàng)的實(shí)施例中，抗體包含hcvr和lcvr，該hcvr含有seq?id?no:?23或其變體，該變體包含與seq?id?no:?23具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的氨基酸序列；該lcvr含有seq?id?no:?24或其變體，該變體包含與seq?id?no:?24具有至少95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的氨基酸序列。在實(shí)施例中，seq?id?no:?23的變體包含與seq?id?no:?23相關(guān)的不超過6、5、4、3、2或1個氨基酸取代、插入或缺失，并且seqid?no:?24的變體包含與seq?id?no:?24相關(guān)的不超過6、5、4、3、2或1個氨基酸取代、插入或缺失，其中變異發(fā)生在hcvr、lcvr或者h(yuǎn)cvr和lcvr兩者的框架區(qū)中。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?23的hcvr和含有seq?id?no:?24的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含由seq?idno:?23組成的hcvr和由seq?id?no:?24組成的lcvr。
6、在上述任一項(xiàng)的實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?29，并且lc含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，其中每個hc含有seq?id?no:?29，并且每個lc含有seqid?no:?30。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，其中每個hc由seq?id?no:?29組成，并且每個lc由seq?id?no:?30組成。在實(shí)施例中，抗體由兩個hc和兩個lc組成，其中每個hc由seq?id?no:?29組成，并且每個lc由seq?id?no:?30組成。
7、本文提供了抗cd30l抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?29的hc和含有seq?id?no:30的lc。還提供了包含兩個hc和兩個lc的抗cd30l抗體，每個hc含有seq?id?no:?29，并且每個lc含有seq?id?no:30。進(jìn)一步提供了由兩個hc和兩個lc組成的抗cd30l抗體，每個hc由seq?id?no:?29組成，并且每個lc由seq?id?no:30組成。
8、還提供了抗cd30l抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?33、36或39的hc和含有seqid?no:30的lc。在一個實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?33，并且lc含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?33，并且每個lc含有seq?id?no:?30。在另一個實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?36，并且lc含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?36，并且每個lc含有seq?id?no:?30。在另外的實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?39，并且lc含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?39，并且每個lc含有seq?id?no:?30。
9、本文還提供了抗cd30l抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?25的hc和含有seq?idno:?26的輕鏈。提供了包含兩個hc和兩個lc的抗cd30l抗體，其中每個hc含有seq?id?no:25，并且每個lc含有seq?id?no:?26。進(jìn)一步提供了由兩個hc和兩個lc組成的抗cd30l抗體，其中每個hc由seq?id?no:25組成，并且每個lc由seq?id?no:?26組成。還提供了抗cd30l抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?31、34或37的hc和含有seq?id?no:?26的lc。在一個實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?31，并且lc含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?31，并且每個lc含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?34，并且lc含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?34，并且每個lc含有seq?id?no:?26。在另一個實(shí)施例中，hc含有seq?id?no:?37，并且lc含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，抗體包含兩個hc和兩個lc，并且其中每個hc含有seq?id?no:?37，并且每個lc含有seq?id?no:?26。
10、在實(shí)施例中，本文所述的抗體?(a)?以小于100、75或50皮摩爾的解離常數(shù)（kd）值與人cd30l結(jié)合，如通過表面等離子體共振技術(shù)或動力學(xué)排阻測定所測量的；(b)?以小于100、75或50皮摩爾的kd值與食蟹猴cd30l結(jié)合，如通過表面等離子體共振技術(shù)或動力學(xué)排阻測定所測量的；(c)?以相差10倍以內(nèi)的親和力與人cd30l和食蟹猴cd30l結(jié)合；(d)?阻斷人cd30l與人cd30的結(jié)合，如通過基于細(xì)胞的測定所確定的；或者?(e)?抑制cd30l誘導(dǎo)的il-8分泌，如通過基于細(xì)胞的測定所確定的。
11、在本披露的抗體的實(shí)施例中，抗體與cd30l特異性結(jié)合。例如，提供了與cd30l特異性結(jié)合的抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?1的hcdr1、含有seq?id?no:?2的hcdr2、含有seq?id?no:?3的hcdr3、含有seq?id?no:?4的lcdr1、含有seq?id?no:?5的lcdr2和含有seqid?no:?6的lcdr3。還提供了與cd30l特異性結(jié)合的抗體，該抗體包含含有seq?id?no:?7的hcdr1、含有seq?id?no:?8的hcdr2、含有seq?id?no:?9的hcdr3、含有seq?id?no:?10的lcdr1、含有seq?id?no:?11的lcdr2和含有seq?id?no:?12的lcdr3。
12、本披露提供了治療患者的炎性障礙的方法，該方法包括向該患者施用有效量的本披露的抗體。在實(shí)施例中，炎性障礙是哮喘。在實(shí)施例中，炎性障礙是重度哮喘。在實(shí)施例中，炎性障礙是狼瘡。在實(shí)施例中，炎性障礙是潰瘍性結(jié)腸炎。
13、還提供了分離的多核苷酸分子，這些分離的多核苷酸分子包含編碼本披露的任何抗體的重鏈和/或輕鏈的核酸序列。在一個方面，提供了編碼與cd30l結(jié)合的抗體的hcvr、lcvr、hc、lc、lcvr和hcvr、或lc和hc的多核苷酸，其中該抗體包含含有seq?id?no:?1的hcdr1、含有seq?id?no:?2的hcdr2、含有seq?id?no:?3的hcdr3、含有seq?id?no:?4的lcdr1、含有seq?id?no:?5的lcdr2和含有seq?id?no:?6的lcdr3。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?19的hcvr和含有seq?id?no:?20的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?idno:?25的hc和含有seq?id?no:?26的lc。
14、在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hcvr，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?idno:?19。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lcvr，其中該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:20。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hcvr和lcvr兩者，其中該hcvr的氨基酸序列含有seqid?no:?19，并且該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?20。
15、在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hc，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:25。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lc，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lc和hc兩者，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?25，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。
16、在實(shí)施例中，編碼抗體lc的多核苷酸含有seq?id?no:?18的核酸序列。在實(shí)施例中，編碼抗體hc的多核苷酸含有seq?id?no:?21的核酸序列。
17、在一個方面，還提供了編碼與cd30l結(jié)合的抗體的hcvr、lcvr、hc、lc、lcvr和hcvr、或lc和hc的多核苷酸，其中該抗體包含含有seq?id?no:?7的hcdr1、含有seq?id?no:?8的hcdr2、含有seq?id?no:?9的hcdr3、含有seq?id?no:?10的lcdr1、含有seq?id?no:?11的lcdr2和含有seq?id?no:?12的lcdr3。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?23的hcvr和含有seq?id?no:?24的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?29的hc和含有seq?idno:?30的lc。
18、在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hcvr，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?idno:?23。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lcvr，其中該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:24。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hcvr和lcvr兩者，其中該hcvr的氨基酸序列含有seqid?no:?23，并且該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?24。
19、在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的hc，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:29。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lc，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，多核苷酸編碼抗體的lc和hc兩者，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?29，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。
20、在實(shí)施例中，編碼抗體lc的多核苷酸含有seq?id?no:?16的核酸序列。在實(shí)施例中，編碼抗體hc的多核苷酸含有seq?id?no:?17的核酸序列。
21、在實(shí)施例中，本披露提供了包含本披露的任何多核苷酸的載體。在實(shí)施例中，載體是重組表達(dá)載體。在實(shí)施例中，載體包含編碼與cd30l結(jié)合的抗體的hcvr、lcvr、hc、lc、lcvr和hcvr、或lc和hc的多核苷酸，其中該抗體包含含有seq?id?no:?1的hcdr1、含有seq?idno:?2的hcdr2、含有seq?id?no:?3的hcdr3、含有seq?id?no:?4的lcdr1、含有seq?id?no:?5的lcdr2和含有seq?id?no:?6的lcdr3。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?19的hcvr和含有seq?id?no:?20的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?25的hc和含有seq?idno:?26的lc。
22、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hcvr的多核苷酸，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?19。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lcvr的多核苷酸，其中該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:??20。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hcvr和lcvr兩者的多核苷酸，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?19，并且該lcvr的氨基酸序列含有seq?idno:?20。
23、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seqid?no:?25。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lc的多核苷酸，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lc和hc兩者的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?25，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。
24、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體lc的多核苷酸，其中編碼lc的多核苷酸含有seqid?no:?18的核酸序列。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體hc的多核苷酸，其中編碼hc的多核苷酸含有seq?id?no:?21的核酸序列。
25、還提供了包含編碼與cd30l結(jié)合的抗體的hcvr、lcvr、hc、lc、lcvr和hcvr、或lc和hc的多核苷酸的載體，其中該抗體包含含有seq?id?no:?7的hcdr1、含有seq?id?no:?8的hcdr2、含有seq?id?no:?9的hcdr3、含有seq?id?no:?10的lcdr1、含有seq?id?no:?11的lcdr2和含有seq?id?no:?12的lcdr3。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?23的hcvr和含有seq?id?no:?24的lcvr。在實(shí)施例中，抗體包含含有seq?id?no:?29的hc和含有seq?idno:?30的lc。
26、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hcvr的多核苷酸，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?23。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lcvr的多核苷酸，其中該lcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:??24。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hcvr和lcvr兩者的多核苷酸，其中該hcvr的氨基酸序列含有seq?id?no:?23，并且該lcvr的氨基酸序列含有seq?idno:?24。
27、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的hc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seqid?no:?29。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lc的多核苷酸，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體的lc和hc兩者的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?29，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。
28、在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體lc的多核苷酸，其中編碼lc的多核苷酸含有seqid?no:?16的核酸序列。在實(shí)施例中，載體包含編碼抗體hc的多核苷酸，其中編碼抗體hc的多核苷酸含有seq?id?no:?17的核酸序列。
29、本披露提供了包含本披露的任何多核苷酸或包含本披露的任何載體的宿主細(xì)胞。在實(shí)施例中，提供了已經(jīng)引入本披露的載體的宿主細(xì)胞。在實(shí)施例中，宿主細(xì)胞包含載體，該載體包含編碼抗體hc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?25。在實(shí)施例中，宿主細(xì)胞包含載體，該載體包含編碼抗體lc的多核苷酸，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。在實(shí)施例中，提供了包含載體的宿主細(xì)胞，該載體包含編碼抗體hc和抗體lc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?25，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?26。本披露還提供了用于產(chǎn)生包含兩個hc和兩個lc的抗體的方法，其中該方法包括?(i)?在使該抗體表達(dá)的條件下培養(yǎng)本披露的宿主細(xì)胞，和?(ii)?回收所表達(dá)的抗體。在實(shí)施例中，每個hc含有seq?id?no:?25，并且每個lc含有seq?id?no:?26。本披露還提供了可通過所述方法獲得的抗體。
30、在實(shí)施例中，宿主細(xì)胞包含載體，該載體包含編碼抗體hc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seq?id?no:?29。在實(shí)施例中，宿主細(xì)胞包含載體，該載體包含編碼抗體lc的多核苷酸，其中該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。在實(shí)施例中，提供了包含載體的宿主細(xì)胞，該載體包含編碼抗體hc和抗體lc的多核苷酸，其中該hc的氨基酸序列含有seqid?no:?29，并且該lc的氨基酸序列含有seq?id?no:?30。本披露還提供了用于產(chǎn)生包含兩個hc和兩個lc的抗體的方法，其中該方法包括?(i)?在使該抗體表達(dá)的條件下培養(yǎng)本披露的宿主細(xì)胞，和?(ii)?回收所表達(dá)的抗體。在實(shí)施例中，每個hc含有seq?id?no:?29，并且每個lc含有seq?id?no:?30。本披露還提供了可通過所述方法獲得的抗體。
31、本披露提供了用于在療法中使用的本披露的抗體。
32、本披露提供了用于在治療炎性障礙中使用的本披露的抗體。在實(shí)施例中，炎性障礙是哮喘。在實(shí)施例中，炎性障礙是狼瘡。在實(shí)施例中，炎性障礙是潰瘍性結(jié)腸炎。
33、本披露提供了用于制造用于治療炎性障礙的藥物的本披露的抗體。在實(shí)施例中，炎性障礙是哮喘。在實(shí)施例中，炎性障礙是狼瘡。在實(shí)施例中，炎性障礙是潰瘍性結(jié)腸炎。
34、本披露提供了藥物組合物，該藥物組合物包含本披露的抗體以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載劑、稀釋劑或賦形劑。