本發明屬于化妝品，尤其涉及種含山茶花pdrn抗光老化舒緩修護組合物及其制備方法和應用。
背景技術：
1、皮膚衰老是內源性生理退行性與外源性環境損傷共同作用的結果，其中光老化（photoaging）作為外源性衰老的主要誘因，占面部衰老表型的80%以上。紫外線（uv）輻射通過產生活性氧（ros）引發dna損傷、激活mmp-1介導的膠原降解，并刺激il-6、tnf-α等促炎因子釋放，導致表皮層屏障功能受損、真皮層彈性纖維斷裂及色素代謝紊亂。研究表明，長期紫外線暴露可使皮膚角質層含水量下降40%，真皮乳頭層膠原密度減少50%，加速皺紋形成與膚色暗沉。
2、現有抗衰老技術體系在應對敏感性皮膚需求時面臨嚴峻挑戰。傳統功效成分如視黃醇及其衍生物在促進膠原再生的同時，會干擾角質形成細胞的分化進程，導致皮膚屏障關鍵蛋白（如兜甲蛋白、內披蛋白）表達下調，破壞角質層"磚墻結構"的完整性。維生素c類成分在氧化還原過程中產生的活性中間體可能激活nlrp3炎癥小體，誘發caspase-1依賴的炎癥反應，加劇皮膚泛紅、刺痛等不適癥狀。盡管現有技術嘗試通過脂質體包封、前藥設計等遞送系統來降低刺激性，但這些載體材料本身可能改變皮膚微環境平衡，且無法從根本上解決活性成分作用機制與皮膚耐受性之間的內在矛盾。這種技術局限性導致敏感性皮膚人群在追求抗衰老效果時往往陷入"功效與溫和不可兼得"的困境，嚴重制約了抗衰老產品的適用邊界和市場滲透率。
3、與此同時，為改善上述問題，現有技術中也有使用生物活性成分如多聚脫氧核糖核苷酸（pdrn）的嘗試，在當前生物活性成分的應用領域中，pdrn主要通過動物源途徑獲取，其中以鮭魚精子提取物最為常見。在安全性層面，動物源材料潛在的病毒污染風險和免疫原性反應始終是行業關注的焦點，特別是對于皮膚屏障功能受損的敏感肌人群而言，這些不確定性因素可能引發不必要的免疫應答或過敏反應。
技術實現思路
1、本發明的目的在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種能夠有效地抗光老化，且對敏感肌友好，能夠有效的舒緩修護肌膚的含山茶花pdrn抗光老化舒緩修護組合物及其制備方法和應用。
2、為實現上述目的，在本發明的第一方面，本發明提供了一種山茶花pdrn的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：
3、（1）將山茶花粉碎后加入包括乙二胺四乙酸的緩沖液中，得懸浮液；
4、（2）將懸浮液進行微流化處理，隨后固液分離，收集上清液；所述微流化處理的壓力為100-150mpa；
5、（3）往上清液中加入無水乙醇后靜置，隨后固液分離，收集沉淀并洗滌、干燥，得粗提pdrn；
6、（4）將粗提pdrn溶解于去離子水后進行凝膠柱層析，收集100-300kda的洗脫液并凍干，得山茶花pdrn。
7、發明人前期研究發現，多聚脫氧核糖核苷酸（pdrn）作為一種具有多靶點修護功能的生物活性成分，為抗衰老領域提供了全新的技術路徑。與傳統的單一作用機制成分相比，pdrn在抗衰老方面展現出獨特優勢：其可通過激活腺苷a2a受體同步促進細胞增殖與遷移，通過調控tgf-β/smad信號通路刺激膠原蛋白合成，并通過抑制nf-κb通路減輕紫外線引發的炎癥反應。研究表明，pdrn還能通過激活嘌呤能信號通路改善線粒體功能，提升細胞能量代謝水平，從根源上延緩衰老進程。在皮膚屏障修護方面，pdrn可上調角質形成細胞中絲聚蛋白和緊密連接蛋白等屏障蛋白的表達，完善角質層屏障結構。這種"修護-再生-防護"的多維作用機制使pdrn在抗衰老領域展現出顯著優勢，特別是其良好的生物相容性為敏感性皮膚提供了更為安全有效的抗衰老解決方案。
8、在上述研究基礎上，本發明進一步通過選擇合適的制備方法，通過先將山茶花低溫冷凍干燥粉碎后加入緩沖液進行微流化處理，隨后收集上清液加入無水乙醇中靜置，接著將靜置后的沉淀進行凝膠柱層析，收集特定分子量范圍的洗脫液并干燥，從而得到純度較高的山茶花pdrn；經后續實驗證實，采用本發明提供的制備方法制備得到的山茶花pdrn與人體細胞內受體的結合能力較強，具有優異的啟動細胞內源性修護的能力，有效的阻斷紫外線引發的光老化連鎖反應，還能從細胞能量供應層面改善皮膚新陳代謝，為皮膚修護提供持續的能量支持。
9、更具體地，本發明采用的制備方法引入微流化物理研磨提取技術，能夠在低溫條件下實現植物細胞壁的機械性破壞，完整的保留dna片段的生物活性結構，能夠避免現有技術中化學溶劑殘留和酶解導致的序列損傷，從而能夠獲得分子量分布集中且gc堿基含量與人類基因組相似度達85%以上的標準化山茶花pdrn；并且植物源的特性使其完全規避了動物源材料的生物安全風險，同時其規整的分子結構確保了與皮膚細胞受體的高效結合，展現出更優越的生物相容性和作用穩定性。特別值得注意的是，植物pdrn可通過雙重機制發揮抗衰老作用：既保持傳統pdrn的a2a受體激活能力，促進膠原蛋白合成和炎癥因子抑制，又能通過線粒體轉錄因子a（tfam）的上調促進細胞能量代謝，從根源上改善皮膚細胞的再生能力。
10、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，山茶花和tris-hcl緩沖液的質量體積比為1g：（15-25）ml。
11、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，緩沖液的ph值為7.5-8.5。
12、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，緩沖液中溶質的摩爾濃度為10-20?mmol/l。
13、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，所述懸浮液中，所述乙二胺四乙酸的摩爾濃度為8-12mmol/l。
14、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，所述緩沖液包括tris-hcl緩沖液、pbs緩沖液中的任意一種。
15、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，粉碎前還包括冷凍干燥的過程。
16、優選地，所述冷凍干燥的溫度為（-85）-（-75）℃，時間為48-72h。
17、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，粉碎為粉碎至60-80目。
18、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（1）中，緩沖液的溫度為0-4℃。
19、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（2）中，微流化處理的溫度為0-4℃，循環次數為1-4次。
20、優選地，所述步驟（2）中，微流化處理的壓力為120-130mpa，溫度為0-4℃，循環次數為2-3次。
21、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（2）中，固液分離為離心，所述離心的溫度為2-6℃，轉速為10000-14000rpm，時間為15-25min。
22、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（3）中，以上清液的體積計，無水乙醇的體積為1.5-3倍。
23、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（3）中，靜置的溫度為（-25）-（-15）℃，靜置的時間為10-18h。
24、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（3）中，固液分離為離心，所述離心的溫度為0-4℃，轉速為12000-14000rpm，時間為25-35min。
25、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（4）中，凍干的溫度為（-60）-（-50）℃，時間為24-28h。
26、作為本發明所述制備方法的優選實施方式，所述步驟（4）中，所述凝膠柱層析中，洗脫液包括tris-hcl緩沖液。
27、優選地，所述tris-hcl緩沖液中包括濃度為1-10?mmol/l的乙二胺四乙酸，所述tris-hcl緩沖液的ph值為6.5-8.0，所述tris-hcl緩沖液中溶質的摩爾濃度為10-20?mmol/l。
28、優選地，所述步驟（4）中，洗脫液的流速為1-2?ml/min，洗脫溫度為4-20℃。本發明研究發現，進一步選擇制備方法的參數在上述范圍內，能夠更好的實現山茶花pdrn的制備。
29、本發明的第二方面，提供了一種山茶花pdrn，所述山茶花pdrn采用如本發明所述制備方法制備得到。
30、本發明的第三方面，提供了一種基于山茶花pdrn抗光老化舒緩修護的組合物，所述組合物包括本發明所述山茶花pdrn、絲心蛋白、牛油果樹果脂、4-叔丁基環己醇。
31、本發明研究發現，通過將采用本發明制備方法制備得到的山茶花pdrn與絲心蛋白、牛油果樹果脂和4-叔丁基環己醇進行復配，能夠有效的實現抗光老化的作用，同時還具有良好的舒緩修護作用。
32、具體地，第一方面，采用本發明制備方法制備得到的山茶花pdrn作為核心修護成分，通過其獨特的核苷酸序列激活細胞膜表面的腺苷a2a受體，啟動細胞內源性修護程序；這一激活過程不僅促進成纖維細胞中膠原蛋白和彈性蛋白的合成，還能顯著抑制基質金屬蛋白酶的表達，有效阻斷紫外線引發的光老化連鎖反應；同時，山茶花pdrn通過上調線粒體轉錄因子a的表達，增強線粒體生物合成功能，從細胞能量供應層面改善皮膚新陳代謝，為皮膚修護提供持續的能量支持；與其他來源的pdrn相比，采用本發明制備方法制備得到的山茶花來源的pdrn具有更高的生物相容性和更優的細胞滲透性，能更有效地發揮其生物學功能。
33、第二方面，絲心蛋白在本發明提供的組合物中發揮著雙重作用；首先，其獨特的β-折疊結構能在皮膚表面形成一層透氣的保護膜，這層薄膜不僅能有效減少經皮水分流失，還能作為物理屏障抵御外界環境刺激；其次，絲心蛋白的三維網絡結構為山茶花pdrn提供了理想的載體系統，通過分子間的疏水作用和氫鍵結合，形成穩定的緩釋體系，確保活性成分能夠持續、穩定地作用于皮膚深層；這種載體功能顯著提高了山茶花pdrn的生物利用度，延長了其作用時間。
34、第三方面，組合物中的牛油果樹果脂富含的三萜類化合物和不飽和脂肪酸，能夠與皮膚角質層中的脂質雙分子層發生仿生融合，有效修護受損的皮膚屏障結構；其含有的天然維生素e和植物甾醇具有顯著的抗氧化活性，能協同山茶花pdrn清除紫外線產生的活性氧物種，減輕氧化應激損傷；同時，牛油果樹果脂的脂質成分還能增強絲心蛋白成膜的可塑性，使保護膜更加柔軟且富有彈性，提升使用的舒適度。
35、第四方面，組合物中的4-叔丁基環己醇作為高效的trpv1受體拮抗劑，能夠特異性阻斷紫外線激活的鈣離子通道，迅速抑制神經源性炎癥反應；這一作用機制能有效緩解皮膚的灼熱、刺痛等不適感，為其他修護成分創造穩定的作用環境；并且，4-叔丁基環己醇的立體構型使其具有優異的熱穩定性，能與絲心蛋白網絡結構良好相容，確保其在配方中的穩定性與持久性。
36、作為本發明所述組合物的優選實施方式，?所述組合物包括以下質量份的組分：0.001-1份山茶花pdrn、0.001-1份絲心蛋白、0.1-3份牛油果樹果脂、0.1-3份4-叔丁基環己醇。
37、作為本發明所述組合物的優選實施方式，所述組合物包括以下質量份的組分：0.01-0.8份山茶花pdrn、0.01-0.8份絲心蛋白、0.5-2.5份牛油果樹果脂、0.5-2.5份4-叔丁基環己醇。
38、作為本發明所述組合物的優選實施方式，所述組合物包括以下質量份的組分：0.1-0.3份山茶花pdrn、0.1-0.3份絲心蛋白、1-2份牛油果樹果脂、1-2份4-叔丁基環己醇。
39、本發明研究發現，組合物中組分的質量份在一定程度上會影響組分之間的相互作用，當進一步選擇組分的質量份在上述范圍內時，得到的組合物的綜合效果更優。
40、作為本發明所述組合物的優選實施方式，所述絲心蛋白和牛油果樹果脂的質量比為1：（3-50）。例如可為1:3、1:5、1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35、1:40、1:45、1:50等。
41、優選地，所述絲心蛋白和牛油果樹果脂的質量比為1：（7-8）。
42、本發明研究發現，絲心蛋白和牛油果樹果脂的質量比會影響牛油果樹果脂對絲心蛋白成膜的可塑性大小，進而影響絲心蛋白對山茶花pdrn的支撐以及緩釋能力，同時還會影響體系中4-叔丁基環己醇的立體構型穩定能力；當進一步選擇兩者的質量比在上述范圍內時，得到的組合物的綜合效果更優。
43、本發明的第四方面，本發明提供了所述組合物在化妝品上的應用。
44、本發明的第五方面，本發明提供了一種化妝品，所述化妝品包括本發明所述組合物。
45、本發明提供的化妝品中包括本發明所述組合物，其能夠有效的實現抗光老化效果，且還具有優異的舒緩修護功效。
46、作為本發明所述化妝品的優選實施方式，所述化妝品中，本發明所述組合物的質量百分數為0.1-12%。
47、將本發明提供的組合物作為功效組分以上述質量百分數的含量添加進化妝品的制備上時，得到的化妝品具有良好的抗光老化作用以及舒緩修護的作用；當進一步提升組合物的質量百分數時，對功效提升能力不顯著。
48、作為本發明所述化妝品的優選實施方式，所述化妝品還包括增稠劑、保濕劑、乳化劑、油脂、防腐劑、ph調節劑和水中的至少一種。
49、作為本發明所述化妝品的優選實施方式，所述化妝品中，包括以下質量百分數的組分：本發明所述組合物0.1-6%、增稠劑0.01-1%、保濕劑1-5%、乳化劑0.1-6%、油脂5-8%、防腐劑0.1-2%、ph調節劑0.01-0.5%、水余量。
50、優選地，所述增稠劑包括黃原膠、卡波姆、丙烯酸羥乙酯/丙烯酰二甲基?；撬徕c共聚物、丙烯酰二甲基牛磺酸銨/vp共聚物和小核菌膠中的至少一種。
51、優選地，所述保濕劑包括尿囊素、甜菜堿、β-葡聚糖、海藻糖、辛甘醇、雙丙甘醇、透明質酸鈉、1,3-丁二醇、甘油、d-泛醇和神經酰胺中的至少一種。
52、優選地，所述乳化劑包括c14-22醇、c12-20烷基葡糖苷、鯨蠟硬脂基葡糖苷和蔗糖硬脂酸酯中的至少一種。
53、優選地，所述油脂包括辛酸/癸酸甘油三酯、異壬酸異壬酯、季戊四醇四酯、聚二甲基硅氧烷、硬脂醇、羥基硬脂酸、聚甲基倍半硅氧烷、季戊四醇二硬脂酸酯中的至少一種。
54、優選地，所述防腐劑包括1,3-丙二醇、1,2-己二醇等多元醇和對羥基苯乙酮中的至少一種。
55、優選地，所述ph調節劑包括精氨酸、乙二胺四乙酸二鈉、氨丁三醇、edta-二鈉、三乙醇胺中的至少一種。
56、作為本發明所述化妝品的優選實施方式，所述化妝品包括化妝水、乳液、面霜、面膜、精華液、防曬霜、噴霧中的任意一種。
57、與現有技術相比，本發明的有益效果為：
58、本發明提供了一種山茶花pdrn的制備方法，采用本發明制備方法制備得到的山茶花pdrn與絲心蛋白、牛油果樹果脂、4-叔丁基環己醇進行復配使用，能夠有效的實現抗光老化的作用，同時還具有良好的舒緩修護作用；從而能夠廣泛的應用于化妝品的制備中，實現對應的抗光老化和舒緩、修護效果。