一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒的制作方法

一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于丙型肝炎檢測【技術領域】，具體涉及一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒。試劑盒包括蛋白包被板、酶結(jié)合物、對照血清、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑和終止液。本發(fā)明將抗丙型肝炎病毒核心抗原的抗體和丙型肝炎病毒其他亞型重組蛋白固定到固相載體上，能保證樣本中的丙肝核心抗原及多種亞型的抗體都可以通過免疫反應吸附到固相載體上，避免了漏檢；試劑盒中的酶結(jié)合物，是對包被抗體和抗原配對的對應抗體和抗原進行酶標記，能夠與包被抗體和抗原配對應用，保證檢測的特異性。本發(fā)明的試劑盒，選用大分子物質(zhì)作為封閉液，無蛋白結(jié)構(gòu)，同時在封閉液中加入蛋白保護劑，有效保證了試劑盒的穩(wěn)定性。
【專利說明】一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于丙型肝炎檢測【技術領域】，具體涉及一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合 檢測試劑盒。

【背景技術】
[0002] 丙型病毒性肝炎，簡稱為丙型肝炎、丙肝，是一種由丙型肝炎病毒（HCV)感染引起 的病毒性肝炎，主要經(jīng)輸血、針刺、吸毒等傳播，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球HCV的感染率約 為3%，估計約1. 8億人感染了 HCV，每年新發(fā)丙型肝炎病例約3. 5萬例。丙型肝炎呈全球性 流行，可導致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細胞癌（HCC)。 未來20年內(nèi)與HCV感染相關的死亡率(肝衰竭及肝細胞癌導致的死亡)將繼續(xù)增加，對患者 的健康和生命危害極大，已成為嚴重的社會和公共衛(wèi)生問題。根據(jù)衛(wèi)生部歷年公布的丙肝 疫情人數(shù)如圖1所示。
[0003] 丙型肝炎病毒（HCV)為嗜肝性慢性病毒HCV感染后，患者的起病和臨床癥狀極不 典型，以亞臨床感染為多見，容易造成漏診。HCV感染的慢性化發(fā)生率明顯高于乙型肝炎，較 乙型肝炎易早期出現(xiàn)肝硬化、肝癌，死亡率較高。因此HCV的檢測對丙型肝炎病毒感染的早 期診斷和指導臨床治療有重大的意義。
[0004] 國內(nèi)至今還沒有丙型肝炎（簡稱丙肝）預防疫苗問世也沒有特效藥物治療，而早 期診斷仍是防止HCV傳播的有效手段。目前用于檢測丙肝的試劑主要是檢測HCVRNA的 RT-PCR方法，針對抗-HCVELISA檢測試劑，以及針對于HCV-cAg的ELISA檢測試劑。其中 RT-PCR檢測HCVRNA價格昂貴，操作繁雜，不適于廣泛推廣；抗-HCVELISA檢測的丙肝抗體 是在人體對丙肝抗原產(chǎn)生免疫反應后，才可以檢測到，因此有一個較長的"窗口期"，一般要 感染后70天才能很好檢測到；2001年Ortho公司推出了檢測HCV核心抗原（HCV-cAg) ELISA 試劑，通過大量臨床考核評價，證明比抗-HCV試劑檢出早，但是還是存在一定的漏檢，造成 在臨床應用中，經(jīng)試劑篩選后，仍有少部分輸血后丙肝發(fā)生。有部分血站或醫(yī)院，同時應用 丙肝抗體和丙肝核心抗原兩種試劑盒進行檢測，但這不僅加大了醫(yī)護人員的工作量，而且 大大增大了檢測成本。這些檢測方法的缺陷制約了丙肝檢測試劑的臨床應用。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對于現(xiàn)在臨床對丙肝檢測存在漏檢，而且利用多種試劑盒操作造成工作量增 大、成本增加的問題，本發(fā)明提供了一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測的試劑盒，該試 劑盒能靈敏、準確的檢測丙型肝炎病毒。
[0006] 本發(fā)明解決上述技術問題采用的技術方案是： 一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒，包括蛋白包被板和酶結(jié)合物； 所述的，蛋白包被板是由以下方法制備得到的：PH7. 4濃度0. 02mol/L的磷酸鹽緩沖 液將包被蛋白稀釋成1:2000濃度，制得包被液；pH7. 4濃度為0.02mol/L的磷酸鹽緩沖 液將抗原和抗體稀釋成一定濃度；按100 U L/孔加入稀釋好的包被液，在37°C下包被2小 時；棄去包被板內(nèi)的包被液，將包被板拍干，按IOOy L-300ii L /孔加入包被板封閉液，在 2-8°C下包被16-20小時；棄去包被板內(nèi)的封閉液，將包被板拍干后，放置于濕度小于30% 的35-39°C干燥箱中烘干4-6小時，即得蛋白包被板。
[0007] 本發(fā)明所用的包被蛋白為：a)抗丙型肝炎病毒核心抗原的抗體Al ;b)丙型肝炎病 毒其他亞型重組蛋白為NS3、NS4、NS5等所有由丙型肝炎病毒RNA表達的其他蛋白。
[0008] 所述的，酶結(jié)合物是通過以下方法制備得到的：將5mg辣根過氧化物酶溶于Iml濃 度為0. 2mol/L、pH5. 6醋酸鹽緩沖液中，再加入體積濃度為1%的2, 4-二硝基氟苯的無水 乙醇溶液〇. lml，室溫下攪拌lh，得溶液1 ;在溶液1中加入新鮮配置的0. lmol/L的NaIO40. 5ml，4°C放置30min，得溶液2 ;在溶液2中加入體積濃度為2. 5%的乙二醇lml，室溫下攪 拌lh，得溶液3 ;在溶液3中加入辣根過氧化物酶標記的蛋白5mg，用pH9. 5濃度為I. Omol/ L的碳酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH值至9. 0,混勻，4°C過夜，得溶液4 ;在溶液4中加入0. Imol/ L的硼氫化鈉溶液0. lml，混勻，4°C放置3h，得溶液5 ;在溶液5中加入濃度為0. Olmol/L、 pH7. 4磷酸鹽緩沖液，4°C透析過夜，換液3次，得溶液6 ;將溶液6離心30min，去除沉淀物， 所得上清液即為酶結(jié)合物。
[0009] 本發(fā)明辣根過氧化物酶標記的蛋白為：a)丙型肝炎病毒核心抗原另一活性位點的 抗體A2 ;b)丙型肝炎病毒其他亞型重組蛋白配對的NS3、NS4、NS5等所有由丙型肝炎病毒 RNA表達的其他蛋白。
[0010] 所述的，包被板封閉液是由以下物質(zhì)組成的：TriS-HCl緩沖液（pH=7. 4) 0. Imol/ U大分子物質(zhì)0. 5-1. Og/L、蛋白保護劑I. 5-10g/L、疊氮鈉0. 5-lg/L ; 所述的，大分子物質(zhì)為PEG-20000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或兩種的混合物； 所述的，蛋白保護劑為海藻糖、吐溫-20中的一種或兩種的混合物。
[0011] 所述的，試劑盒還包括對照血清、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、顯色劑和終止液。
[0012] 本發(fā)明的試劑盒的使用方法如下： 1) 加樣：取出檢測試劑盒，15-30°c放置30分鐘；在蛋白包被板上預設置空白、陰性和 陽性對照各一孔，其余每孔加100 U L樣品稀釋液，再加入100 y L待測樣品；空白孔加入 200 y L樣品稀釋液；陰、陽性對照孔分別加入200 y L陰性、陽性對照血清，混勻后37°C水浴 振蕩90分鐘； 2) 洗板：用1:20稀釋后的洗滌液洗板4次，最后一次拍干； 3) 加酶結(jié)合物：每孔加200 ii L酶結(jié)合物37°C水浴30分鐘，剩余酶結(jié)合物4°C保存； 4) 洗板：洗板同步驟2); 5) 顯色：先加入顯色劑A液IOOii L，再加入顯色劑B液IOOii L，37 °C水浴避光顯色 10-15分鐘； 6) 終止：每孔加50 ill終止液； 7) 測定：10分鐘內(nèi)以酶標儀450nm波長測定各孔OD值； 臨界值確定：陰性對照平均OD值+ 0. 06(若陰性對照平均OD值< 0. 06時，按0. 06計 算；0D>0. 06時，按實際測定陰性對照平均OD值+ 0. 06計算)。測試標本的OD值小于臨界 值則為HCV-cAg陰性。測試標本中的OD值等于或大于臨界值則為HCV-cAg陽性。
[0013] 本發(fā)明試劑盒中所用的陽性對照血清的主要成份為HCV-cAg強陽血清及亞型抗 體；陰性對照血清是主要成份為不含HCV-cAg的正常人血清；樣品稀釋液的主要成份為加 有山羊血清的PBS ;濃縮洗滌液的主要成份為NaCl，磷酸鹽、吐溫-20 ;顯色劑A的主要成份 為過氧化尿素；顯色劑B的主要成份為TMB. 2HCL ;終止液的主要成份為2M H2S04。
[0014] 本發(fā)明試劑盒的反應原理圖，如圖2所示。
[0015] 通過本發(fā)明的技術方案，可以獲得一種同時檢測丙型肝炎病毒的抗原-抗體聯(lián)合 檢測試劑盒，該試劑盒通過在包被板上同時包被丙型肝炎病毒核心抗體和各種亞型蛋白的 方式，降低了檢測的漏檢率，同時通過加入無蛋白大分子的封閉液，保證了試劑盒的高效、 穩(wěn)定，具有很好的潛在臨床應用價值。
[0016] 本發(fā)明的丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測的試劑盒的創(chuàng)新之處在于： (1)將抗丙型肝炎病毒核心抗原的抗體和丙型肝炎病毒其他亞型重組蛋白固定到固相 載體一蛋白包被板上，能保證樣本中的丙肝核心抗原及多種亞型的抗體都可以通過免疫反 應吸附到固相載體上，避免了漏檢。
[0017] (2)試劑盒中的酶結(jié)合物，是對包被抗體和抗原配對的對應抗體和抗原進行酶標 記，能夠與包被抗體和抗原配對應用，保證了試劑盒檢測的特異性。
[0018] (3)本發(fā)明的試劑盒，選用大分子物質(zhì)作為封閉液，無蛋白結(jié)構(gòu)，同時在封閉液中 加入蛋白保護劑，有效地保證了試劑盒的穩(wěn)定性。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0019] 圖1衛(wèi)生部歷年公布丙肝疫情統(tǒng)計圖； 圖2本發(fā)明試劑盒的反應原理圖； 圖3實施例3對比RT-PCR試劑盒檢測相關性。

【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。
[0021] 實施例1 一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒包括對照血清、樣品稀釋液、濃縮洗滌 液、顯色劑、終止液、蛋白包被板和酶結(jié)合物。
[0022] 試劑盒中所用的對照血清包括陽性對照血清和陰性對照血清，陽性對照血清的主 要成份為HCV-cAg強陽血清及亞型抗體；陰性對照血清是主要成份為不含HCV-cAg的正常 人血清；樣品稀釋液的主要成份為加有山羊血清的PBS ;濃縮洗滌液的主要成份為NaCl、磷 酸鹽、吐溫-20 ;顯色劑A的主要成份為過氧化尿素；顯色劑B的主要成份為TMB. 2HCL ;終 止液的主要成份為2M H2S04。
[0023] 蛋白包被板是由以下步驟制得的： pH7. 4濃度為0. 02mol/L的磷酸鹽緩沖液將抗原和抗體稀釋成一定濃度；按100 ii L/ 孔加入稀釋好的包被液，在37°C下包被2小時；棄去包被板內(nèi)的包被液，將包被板拍干，按 100 ii L-300 ii L /孔加入包被板封閉液，在2-8°C下包被16-20小時；棄去包被板內(nèi)的封閉 液，將包被板拍干后，放置于濕度小于30%的35-39°C干燥箱中烘干4-6小時，即得蛋白包 被板。
[0024] 酶結(jié)合物是通過以下方法制備得到的： 將5mg辣根過氧化物酶溶于Iml濃度為0. 2mol/L、pH5. 6醋酸鹽緩沖液中，再加入體 積濃度為1%的2, 4-二硝基氟苯的無水乙醇溶液0. lml，室溫下攪拌lh，得溶液I ;在溶液I 中加入新鮮配置的〇. lmol/L的NaIO4 0. 5ml，4°C放置30min，得溶液2 ;在溶液2中加入體 積濃度為2. 5%的乙二醇lml，室溫下攪拌lh，得溶液3 ;在溶液3中加入辣根過氧化物酶標 記的蛋白5mg，用pH9. 5濃度為I. Omol/L的碳酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH值至9. 0,混勻，4°C 過夜，得溶液4 ;在溶液4中加入0. lmol/L的硼氫化鈉溶液0. lml，混勻，4°C放置3h，得溶 液5 ;在溶液5中加入濃度為0. Olmol/L、pH7. 4磷酸鹽緩沖液，4°C透析過夜，換液3次，得 溶液6 ;將溶液6離心30min，去除沉淀物，所得上清液即為酶結(jié)合物。
[0025] 本實施例的包被板封閉液是由以下物質(zhì)組成的 Tris-HCl 緩沖液（pH=7. 4)0. lmol/L ;PEG-20000 lg/L ;吐溫-20 5g/L ;海藻糖 10g/L ; 疊氮鈉 lg/L。
[0026] 2.試劑盒的應用及檢測操作程序 1) 加樣：取出檢測試劑盒，15-30°C放置30分鐘；在蛋白包被板上預設置空白、陰性、 陽性對照各一孔，其余每孔加100 U L樣品稀釋液，再加入100 y L待測樣品；空白孔加入 200 y L樣品稀釋液；陰、陽性對照孔各加入200 y L陰、陽對照血清，混勻后37°C水浴振蕩 90分鐘； 2) 洗板：用1:20稀釋后的洗滌液洗板4次，最后一次拍干； 3) 加酶結(jié)合物：每孔加200 ii L酶結(jié)合物37°C水浴30分鐘，剩余酶結(jié)合物4°C保存； 4) 洗板：洗板同步驟2); 5) 顯色：先加入顯色劑A液IOOii L，再加入顯色劑B液IOOii L，37 °C水浴避光顯色 10-15分鐘； 6) 終止：每孔加50 ill終止液； 7) 測定：10分鐘內(nèi)以酶標儀450nm波長測定各孔OD值； 臨界值確定：陰性對照平均OD值+ 0. 06(若陰性對照平均OD值< 0. 06時，按0. 06計 算；0D>0. 06時，按實際測定陰性對照平均OD值+ 0. 06計算)。測試標本的OD值小于臨界 值則為HCV-cAg陰性。測試標本中的OD值等于或大于臨界值則為HCV-cAg陽性。
[0027] 實施例2 一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒包括對照血清、樣品稀釋液、濃縮洗滌 液、顯色劑、終止液、蛋白包被板和酶結(jié)合物。
[0028] 試劑盒中所用的對照血清包括陽性對照血清和陰性對照血清，陽性對照血清的主 要成份為HCV-cAg強陽血清及亞型抗體；陰性對照血清是主要成份為不含HCV-cAg的正常 人血清；樣品稀釋液的主要成份為加有山羊血清的PBS ;濃縮洗滌液的主要成份為NaCl、磷 酸鹽、吐溫-20 ;顯色劑A的主要成份為過氧化尿素；顯色劑B的主要成份為TMB. 2HCL ;終 止液的主要成份為2M H2S04。
[0029] 蛋白包被板是由以下步驟制得的： pH7. 4濃度為0. 02mol/L的磷酸鹽緩沖液將抗原和抗體稀釋成一定濃度；按100 ii L/ 孔加入稀釋好的包被液，在37°C下包被2小時；棄去包被板內(nèi)的包被液，將包被板拍干，按 100 ii L-300 ii L /孔加入包被板封閉液，在2-8°C下包被16-20小時；棄去包被板內(nèi)的封閉 液，將包被板拍干后，放置于濕度小于30%的35-39°C干燥箱中烘干4-6小時，即得蛋白包 被板。
[0030] 酶結(jié)合物是通過以下方法制備得到的： 將5mg辣根過氧化物酶溶于Iml濃度為0. 2mol/L、PH5. 6醋酸鹽緩沖液中，再加入體 積濃度為1%的2, 4-二硝基氟苯的無水乙醇溶液0. lml，室溫下攪拌lh，得溶液1 ;在溶液1 中加入新鮮配置的〇. lmol/L的NaIO4 0. 5ml，4°C放置30min，得溶液2 ;在溶液2中加入體 積濃度為2. 5%的乙二醇lml，室溫下攪拌lh，得溶液3 ;在溶液3中加入辣根過氧化物酶標 記的蛋白5mg，用pH9. 5濃度為I. Omol/L的碳酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH值至9. 0,混勻，4°C 過夜，得溶液4 ;在溶液4中加入0. lmol/L的硼氫化鈉溶液0. lml，混勻，4°C放置3h，得溶 液5 ;在溶液5中加入濃度為0. Olmol/L、pH7. 4磷酸鹽緩沖液，4°C透析過夜，換液3次，得 溶液6 ;將溶液6離心30min，去除沉淀物，所得上清液即為酶結(jié)合物。
[0031] 本實施例的包被板封閉液是由以下物質(zhì)組成的： Tris-HCl 緩沖液（pH=7. 4) 0. Olmol/L ;聚乙烯吡咯烷酮 0. 5g/L ;吐溫-20 0. 5g/L ;海 藻糖lg/L ;疊氮鈉0. lg/L。
[0032] 2.試劑盒的應用及檢測操作程序同實施例1。
[0033] 實施例3 一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒包括對照血清、樣品稀釋液、濃縮洗滌 液、顯色劑、終止液、蛋白包被板和酶結(jié)合物。
[0034] 試劑盒中所用的對照血清包括陽性對照血清和陰性對照血清，陽性對照血清的主 要成份為HCV-cAg強陽血清及亞型抗體；陰性對照血清是主要成份為不含HCV-cAg的正常 人血清；樣品稀釋液的主要成份為加有山羊血清的PBS ;濃縮洗滌液的主要成份為NaCl、磷 酸鹽、吐溫-20 ;顯色劑A的主要成份為過氧化尿素；顯色劑B的主要成份為TMB. 2HCL ;終 止液的主要成份為2M H2S04。
[0035] 蛋白包被板是由以下步驟制得的： pH7. 4濃度為0. 02mol/L的磷酸鹽緩沖液將抗原和抗體稀釋成一定濃度；按100 ii L/ 孔加入稀釋好的包被液，在37°C下包被2小時；棄去包被板內(nèi)的包被液，將包被板拍干，按 100 ii L-300 ii L /孔加入包被板封閉液，在2-8°C下包被16-20小時；棄去包被板內(nèi)的封閉 液，將包被板拍干后，放置于濕度小于30%的35-39°C干燥箱中烘干4-6小時，即得蛋白包 被板。
[0036] 酶結(jié)合物是通過以下方法制備得到的： 將5mg辣根過氧化物酶溶于Iml濃度為0. 2mol/L、pH5. 6醋酸鹽緩沖液中，再加入體 積濃度為1%的2, 4-二硝基氟苯的無水乙醇溶液0. lml，室溫下攪拌lh，得溶液1 ;在溶液1 中加入新鮮配置的〇. lmol/L的NaIO4 0. 5ml，4°C放置30min，得溶液2 ;在溶液2中加入體 積濃度為2. 5%的乙二醇lml，室溫下攪拌lh，得溶液3 ;在溶液3中加入辣根過氧化物酶標 記的蛋白5mg，用pH9. 5濃度為I. 0m〇l/L的碳酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH值至9. 0,混勻，4°C 過夜，得溶液4 ;在溶液4中加入0. lmol/L的硼氫化鈉溶液0. lml，混勻，4°C放置3h，得溶 液5 ;在溶液5中加入濃度為0. 01m〇l/L、pH7. 4磷酸鹽緩沖液，4°C透析過夜，換液3次，得 溶液6 ;將溶液6離心30min，去除沉淀物，所得上清液即為酶結(jié)合物。
[0037] 本實施例的包被板封閉液是由以下物質(zhì)組成的： Tris-HCl 緩沖液（pH=7. 4) 0? 05mol/L ;PEG-20000 0? 5g/L ;聚乙烯吡咯烷酮 0? 5g/L ; 吐溫-20 (Tween-20) lg/L ;海藻糖 5g/L ;疊氮鈉 0? 5g/L。
[0038] 2.試劑盒的應用及檢測操作程序同實施例1。
[0039] 效果測試1 選定1〇〇例臨床樣本進行檢測，以實施例1-3制備的試劑盒作為實驗例1-3,美國 ortho公司的丙型肝炎病毒核心抗原試劑盒作為對比例，分別對臨床樣本進行檢測。檢測結(jié) 果如表1所示。

【權(quán)利要求】
1. 一種丙型肝炎病毒抗原-抗體聯(lián)合檢測試劑盒，其特征在于，試劑盒包括蛋白包被 板和酶結(jié)合物；所述蛋白包被板是由以下方法制備得到的：pH7. 4濃度0. 02mol/L的磷酸鹽緩沖液將 抗原和抗體稀釋成1:2000濃度，制得包被液；按100 ii L/孔加入稀釋好的包被液，在37°C 下包被2小時；棄去包被板內(nèi)的包被液，將包被板拍干，按100 ii L-300 ii L /孔加入包被板 封閉液，在2-8°C下包被16-20小時；棄去包被板內(nèi)的封閉液，將包被板拍干后，放置于濕度 小于30%的35-39°C干燥箱中烘干4-6小時，即得蛋白包被板；所述酶結(jié)合物是通過以下方法制備得到的：將5mg辣根過氧化物酶溶于lml濃度為0. 2mol/L、pH5. 6醋酸鹽緩沖液中，再加入體積濃度為1%的2,4-二硝基氟苯的無水乙醇溶 液0. lml，室溫下攪拌lh，得溶液1 ;在溶液1中加入新鮮配置的0. lmol/L的NaI04 0. 5ml， 4°C放置30min，得溶液2 ;在溶液2中加入體積濃度為2. 5%的乙二醇lml，室溫下攪拌lh， 得溶液3 ;在溶液3中加入辣根過氧化物酶標記的蛋白5mg，用pH9. 5濃度為1. Omol/L的碳 酸鹽緩沖液調(diào)節(jié)溶液pH值至9. 0,混勻，4°C過夜，得溶液4 ;在溶液4中加入0. lmol/L的硼 氫化鈉溶液〇. lml，混勻，4°C放置3h，得溶液5 ;在溶液5中加入濃度為0. Olmol/L、pH7. 4 磷酸鹽緩沖液，4°C透析過夜，換液3次，得溶液6 ;將溶液6離心30min，去除沉淀物，所得上 清液即為酶結(jié)合物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述包被板封閉液是由以下物質(zhì)組成 的：pH=7. 4的Tris-HCl緩沖液0. lmol/L、大分子物質(zhì)0. 5-1. 0g/L、蛋白保護劑1. 5-10g/L、 疊氮鈉0. 5-lg/L。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述大分子物質(zhì)為PEG-20000、聚乙烯 吡咯烷酮中的一種或兩種的混合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述蛋白保護劑為海藻糖、吐溫-20中 的一種或兩種的混合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括對照血清、樣品稀釋 液、濃縮洗滌液、顯色劑和終止液。
【文檔編號】G01N33/531GK104407143SQ201410698139
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月28日
【發(fā)明者】謝清華, 王進, 甘宜梧, 譚柏清, 王綺, 肖慧, 包興艷 申請人:山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司