1.一種高產l-色氨酸的基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株表達突變型flhd蛋白和/或突變型gabd蛋白;
2.根據權利要求1所述的高產l-色氨酸的基因工程菌株,其特征在于,所述突變型flhd蛋白的氨基酸序列包括如seq?id?no.3所示的序列;
3.根據權利要求1或2所述的高產l-色氨酸的基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株包括重組大腸桿菌工程菌株。
4.一種權利要求1-3中任一項所述的高產l-色氨酸的基因工程菌株的構建方法,其特征在于,所述構建方法包括:利用同源重組技術,將突變型flhd基因和/或突變型gabd基因整合至宿主微生物的基因組中,替換其相應的野生型基因,即得所述高產l-色氨酸的基因工程菌株。
5.根據權利要求4所述的構建方法,其特征在于,所述同源重組技術包括:在宿主微生物中表達λ-red重組酶,將兩端帶有與基因組目標位點同源臂的線性dna片段電轉化進入所述宿主微生物,所述線性dna片段含有突變型flhd基因和/或突變型gabd基因,通過抗性篩選和基因型驗證獲得正確的重組基因工程菌株。
6.根據權利要求4或5所述的構建方法,其特征在于,所述線性dna片段的制備方法包括:以含有突變型flhd基因和/或突變型gabd基因的質粒為模板,使用如seq?id?no.5-seqid?no.8和/或seq?id?no.9-seq?id?no.12所示的引物進行pcr擴增獲得;所述突變型flhd基因的核酸序列包括如seq?id?no.1所示的序列,所述突變型gabd基因的核酸序列包括如seq?id?no.2所示的序列。
7.根據權利要求4-6中任一項所述的構建方法,其特征在于,所述宿主微生物包括大腸桿菌。
8.權利要求1-3中任一項所述的高產l-色氨酸的基因工程菌株在生產l-色氨酸中的應用。
9.一種生產l-色氨酸的方法,其特征在于,所述方法包括以下:將權利要求1-3中任一項所述的高產l-色氨酸的基因工程菌株接種至種子培養基中進行培養,獲得種子液,將種子液接種至發酵培養基中進行發酵培養,從發酵培養結束后的發酵液中回收l-色氨酸。
10.根據權利要求9所述的方法,其特征在于,所述發酵培養的溫度為35-38℃,攪拌轉速為150-250?rpm,培養時間為20-28小時。