本發明屬于日用化妝品及生物，具體涉及一種含植物提取物的控油去屑洗發水及其制備方法。
背景技術：
1、頭皮屑是一種常見的慢性、復發性頭皮角質層疾病，全球發病率約為50%，在成年人中尤為普遍。其病理生理學機制復雜，通常認為是多因素相互作用的結果，主要包括馬拉色菌（malassezia）屬真菌的定植與過度增殖、宿主頭皮油脂分泌異常（脂溢性皮炎）以及個體表皮屏障功能障礙與免疫反應[1]。在眾多馬拉色菌菌種中，限制性馬拉色菌（malassezia?restricta）和球形馬拉色菌（m.?globosa）被公認為與頭皮屑發生最密切相關的優勢菌種。這些真菌通過分泌脂肪酶分解皮脂中的甘油三酯，產生游離脂肪酸，特別是油酸。油酸作為外源性刺激物，能夠滲透進入角質層，破壞頭皮屏障結構的完整性，進而誘發局部炎癥反應和角質細胞異常脫落，最終形成肉眼可見的頭皮屑。
2、另一方面，頭皮油脂分泌亢進是頭皮屑發生與加重的重要誘因。過量分泌的皮脂不僅為嗜脂性的馬拉色菌提供了豐富的營養源，其真菌代謝產物還會進一步加劇頭皮屏障的損傷。研究表明，皮脂的合成與分泌受雄激素信號通路調控，其中5α-還原酶（srd5a）是該通路中的關鍵限速酶，負責將睪酮轉化為活性更強的二氫睪酮（dht），進而刺激皮脂腺細胞增殖和脂質合成。因此，抑制srd5a活性已成為開發頭皮控油產品的重要靶點。
3、針對上述致病機制，目前市售的去屑控油產品主要分為兩大類：一是化學合成殺菌劑，如吡羅克酮乙醇胺鹽、吡啶硫酮鋅、氯咪巴唑等，其去屑效果顯著，但長期使用存在馬拉色菌耐藥性風險，且部分成分面臨環境安全性審查；二是植物提取物類，如茶樹油、迷迭香提取物等，雖安全性較高，但普遍存在批次穩定性差、作用靶點單一、功效不確切等問題，難以滿足高效、安全及環境友好的復合需求。
4、近年來，單域抗體（vhh）因其分子量?。s15?kda）、穩定性高、易于基因工程改造等優勢，在日化產品研發中展現出潛力。已有研究證實，通過噬菌體展示技術可在含有高濃度表面活性劑的洗發水基質中篩選出特異性結合馬拉色菌細胞壁蛋白malf1的單域抗體，且部分穩定性優異的vhh在其框架2區第44位含有精氨酸殘基，該位點的突變可顯著影響抗體在表活環境中的穩定性[dolk?e,?van?der?vaart?m,?lutje?hulsik?d,?et?al.isolation?of?llama?antibody?fragments?for?prevention?of?dandruff?by?phagedisplay?in?shampoo[j].?applied?and?environmental?microbiology,?2005,?71(1):442-450.]。
5、然而，現有技術中尚未見將抗馬拉色菌單域抗體與具有srd5a抑制活性的天然產物進行復配，以實現“抗菌”與“控油”雙通路協同作用的系統研究。
技術實現思路
1、本發明的目的在于提供一種含植物提取物的控油去屑洗發水及其制備方法。為解決上述技術問題，本發明提供以下技術方案：
2、一種控油去屑洗發水，其特征在于，包含有效量的以下組分：
3、（1）一種抗馬拉色菌單域抗體，其氨基酸序列如seq?id?no:1所示；
4、（2）天門冬根提取物，所述提取物采用超臨界co2流體萃取技術制備，總多酚含量≥5%；
5、（3）化妝品學上可接受的載體。
6、所述的抗馬拉色菌單域抗體命名為vhh-mr8，是通過在含5%月桂醇聚醚硫酸酯鈉和2%椰油酰胺丙基甜菜堿的洗滌條件下進行噬菌體展示篩選獲得的天然穩定序列，其特異性結合馬拉色菌malf1蛋白。所述的天門冬根提取物中，槲皮素含量≥0.5%。
7、優選地，所述的洗發水還包含泛醇0.1%-1%和/或煙酰胺0.5%-2%作為頭皮屏障修復因子。優選地，所述抗馬拉色菌單域抗體的重量百分比為0.005%-0.2%，所述天門冬根提取物的重量百分比為1%-4%。
8、本發明還提供一種制備上述洗發水的方法，包括以下步驟：
9、（1）將表面活性劑相加熱至70-80℃混合均勻；
10、（2）將水相加熱至相同溫度，加入表面活性劑相中乳化，降溫至40℃以下；
11、（3）加入預先用10?mm?pbs緩沖液（ph?6.5）稀釋10倍的抗馬拉色菌單域抗體，以及天門冬根提取物和其他輔料；
12、（4）調節ph至5.5-6.5，補充去離子水至全量，攪拌均勻即得。
13、與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：
14、（1）提供了一種全新的抗馬拉色菌單域抗體vhh-mr8：該抗體是通過在含5%月桂醇聚醚硫酸酯鈉和2%椰油酰胺丙基甜菜堿的嚴苛條件下直接篩選獲得的天然穩定序列，其氨基酸序列如seq?id?no:1所示，框架2區第44位為精氨酸，賦予其優異的表活耐受性。實驗表明，vhh-mr8在含15%?sles和3%?capb的洗發水基質中40℃存放28天后，活性保留率達83.4%，顯著高于對照抗體vhh-wt的22.6%；其解鏈溫度tm值為68.5±0.4℃，顯著高于vhh-wt的61.8±0.5℃。這一穩定性特征使其能夠適應洗發水產品的高表活環境，具有重要的產業應用價值。
15、（2）揭示了天門冬提取物的控油作用機制：本發明首次通過細胞水平實驗證實，天門冬提取物可劑量依賴性地下調人皮脂腺細胞sz95中5α-還原酶（srd5a1）基因的mrna表達。200?μg/ml處理組使srd5a1表達降至對照組的0.42倍，與10?μm非那雄胺（0.38倍）效果相當，且在該濃度范圍內無細胞毒性（細胞活力>95%）。這一發現為天門冬提取物在控油產品中的應用提供了分子機制依據，突破了傳統植物提取物作用機制不明的局限。
16、（3）實現了vhh-mr8抗體與天門冬提取物的協同增效：通過棋盤微量稀釋法證實，vhh-mr8與天門冬提取物在抑制馬拉色菌增殖方面具有顯著的協同效應。最佳組合（0.05?μm抗體+50?μg/ml提取物）的協同指數ci值為0.68，實測抑菌率75.6%顯著高于bliss模型預期值61.7%。陰性對照實驗表明，vhh-wt與天門冬提取物的ci值為1.23，表現為拮抗，證實vhh-mr8與天門冬提取物的協同效應是特異性的、非顯而易見的。這種協同作用使得在配方中可以采用更低濃度的活性成分達到相同的去屑效果，降低了成本和安全風險。
17、（4）產品綜合效果顯著優于現有技術：人體臨床實驗表明，含0.05%?vhh-mr8抗體和2%天門冬提取物的本發明洗發水（樣品s1）在使用4周后，頭皮屑嚴重程度評分（asss）降至8.2分（較基線下降82.5%），頭皮油脂含量降至44.3?μg/cm2（較基線下降64.1%），馬拉色菌dna拷貝數降至3.5?log10（較基線下降47.8%）（表10）。與單一組分相比，樣品s1在三項指標上均顯著優于無抗體組（c1）和無提取物組（c2）（p<0.01）；與陰性對照相比，顯著優于vhh-wt+提取物組（c3）（p<0.001）；與市售化學去屑產品吡羅克酮（c4）相比，在去屑（8.2?vs12.3，p<0.001）和控油（44.3?vs?79.8，p<0.0001）方面具有顯著優勢。安全性評價顯示各組不良事件發生率無顯著差異，本發明洗發水具有良好的安全性。
18、綜上所述，本發明提供了全新的抗馬拉色菌單域抗體vhh-mr8，揭示了天門冬提取物的控油機制，證實了兩者的協同增效作用，并開發出綜合效果優于現有技術的洗發水產品，具有較高的產業應用價值和創造性。